【摘 要】
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目的:确定第1类整合子中aadA2基因翻译起始位点。方法定点突变含有不同翻译起始密码子的aadA2基因盒,用氨基糖苷-3〃-腺苷酰基转移酶[AAD(3〃)]多克隆抗体检测aadA2基因的翻
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目的:确定第1类整合子中aadA2基因翻译起始位点。方法定点突变含有不同翻译起始密码子的aadA2基因盒,用氨基糖苷-3〃-腺苷酰基转移酶[AAD(3〃)]多克隆抗体检测aadA2基因的翻译产物。同时用实时定量PCR及药物敏感性试验检测aadA2基因的转录水平及翻译产物的功能。结果当位于第1类整合子第1位基因盒中,aadA2基因可从ATG和GTG密码子起始翻译,同时在GTG密码子下游还存在着可起始AAD(3〃)蛋白翻译的密码子,aadA2基因从ATG、GTG及GTG下游的密码子起始翻译均可合成有功能的AAD(3〃)蛋白,赋予大肠杆菌对链霉素耐药。结论第1类整合子的结构特点使整合入attI位点基因盒,不需带有核糖体结合位点即可起始基因盒中相应读码框的翻译,这更有利用第1类整合子表达从外界环境中捕获的基因,使得其在临床菌株中分布广泛,基因盒的种类也较多。
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