多重PCR技术同时检测副溶血弧菌和溶藻弧菌方法的建立与初步应用

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为建立多重PCR方法用于同时快速检测海产品中的副溶血弧菌和溶藻弧菌,本研究根据副溶血弧菌(VP)和溶藻弧菌(VA)的toxR基因序列应用Primer Premier 6.0设计了针对这2种细菌的2对特异性引物,建立了能快速同时检测这两种细菌的多重PCR方法,并对该反应体系的特异性和灵敏度进行分析。结果显示纯培养细菌的检测灵敏度分别为VP 2.32×103 cfu/mL和VA 2.56×103cfu/mL,临床病料检测灵敏度分别可达VP 2cfu/mL和VA 3cfu/mL;与枸橼酸杆菌、沙门氏菌、美人鱼弧菌、霍乱弧菌、麦氏弧菌没有交叉反应。研究表明本实验方法操作简便快速、特异性强、灵敏度高、稳定性好,并且经济实惠每个PCR反应成本不到1元,值得推广应用。
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