【摘 要】
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<正>目的:以HBV转录后调节基序(HBV post-transcriptional regulatory element,HPRE)为靶分子,去筛选和鉴定HPRE结合蛋白,希望能够发现新的HPRE结合蛋白,特别是希望发现HPRE
【机 构】
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重庆医科大学病毒性肝炎研究所、教育部感染性疾病分子生物学重点实验室;
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<正>目的:以HBV转录后调节基序(HBV post-transcriptional regulatory element,HPRE)为靶分子,去筛选和鉴定HPRE结合蛋白,希望能够发现新的HPRE结合蛋白,特别是希望发现HPRE抑制性结合蛋白,从而为寻找抗HBV感染药物提供新的靶位和思路。方法:首先利用体外转录技术通过T7 RNA聚合酶体外转录合成大量、高纯度的HPRE分子,然后以固定在96孔平板的HPRE分子为诱饵,在人肝细胞噬菌体展示cDNA 文库中去调取表达有HPRE相互作用蛋白的噬菌体克隆,再通过PCR方法获得相互作用蛋白的cDNA序列,将 cDNA序列在NCBI的BLAST中进行同源性搜索和比对之后,就可以确定与HPRE相互作用的蛋白质。最后,
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