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灵芝是我国著名的药用真菌,因其具有抗肿瘤、提高免疫等作用,已作为功能食品和药品得到广泛应用。灵芝多糖是灵芝的主要活性成分之一,在提高机体免疫功能、抗肿瘤等方面效果显著。但由于灵芝多糖本身结构的复杂性以及因原料来源不同和纯化技术上的差异造成的差别,致使灵芝中包含的多糖种类至今尚未探明,其分子结构也未完全确定。据报道,多糖的结构和构象对其活性有显著影响。本研究通过简单的乙醇沉淀工艺从灵芝子实体热水提取物中分离获得均一多糖GLP20,糖含量为95.9%。单糖组成分析、甲基化分析和NMR图谱解析结果表明,GLP20是一种β-(1→3)-连接为主链、β-(1→6)-连接为支链的葡聚糖,主链与支链糖残基的比例为3:1。采用高效凝胶尺寸排阻色谱-多角度激光散色仪-示差折光检测仪联用技术(HPSEC-MALLS-RI System)分析,GLP20的重均分子量为3.75×106道尔顿,多分散指数为1.36。在0.9%Na Cl溶液中,构象参数ρ值(Rg/Rh)为2.03(>1.8),证明该多糖为棒状结构。GLP20在水溶液中的分子量与其在DMSO溶液中分子量的比值接近3,差式热量扫描仪(DSC)结果显示GLP20多糖在温度为135℃时有明显的有序结构向单链结构转变的现象。通过不同分子量多糖构象特征参数的检测与计算,证明GLP20在水溶液体系中存在三股螺旋构象。体外活性试验结果表明,该多糖具有激活巨噬细胞的作用,大分子量多糖促进巨噬细胞释放细胞因子的活性更好。动物实验结果显示,灵芝多糖具有显著的抗肿瘤活性,对Lewis肺癌小鼠的抑瘤率接近30%,多糖给药组小鼠的脾脏指数、胸腺指数和血清中IgG、Ig M的量都明显高于化疗组和模型组,证明多糖组老鼠的免疫系统没有受到明显的损伤,多糖可以增强荷瘤小鼠的免疫系统,从而起到抑制肿瘤的作用。另外,多糖分子量对其抗炎活性也有显著影响,分子量较低的组分(GLPN)在体外抑制Caco-2细胞炎症因子分泌和动物体内抗DSS结肠炎活性上均表现出较好的效果。