不同激素浓度和配比对番茄遗传转化的影响

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番茄(Lycopersicon esculentum Mill)是系茄科番茄属一年生或多年生草本双子叶植物,同时也是植物遗传转化研究过程中的模式植物,基因组较小,遗传学基础雄厚。其具有富含多种营养成分,培育时间较短,基因组信息清楚,遗传转化较容易等优点。植物遗传转化技术,是应用DNA重组技术有目的地将外源基因或DNA片段通过生物、物理或化学等手段导入受体植物基因组中,以获得外源基因在受体植物中稳定遗传和表达的一门技术。番茄作为模式植物,对其遗传性状、外源基因的合成和载体的构建、基因的整合和表达和植株再生以及优良株系的选育等,已经形成一套较为成熟的技术流程,在植物介导的RNAi、植物寄生线虫功能基因的验证以及抗病虫害等方面取得了巨大的成果,具有广泛的应用前景。本研究以一种常见的番茄品种(粉都80)为材料,通过对子叶的离体培养,测定了不同浓度激素对番茄外植体再生的影响,为下一步农杆菌介导的植物遗传转化奠定基础。研究结果表明:16个不同浓度下玉米素(ZT)和吲哚乙酸(IAA)组合培养对诱导番茄外植体形成愈伤组织和芽的分化具有明显的差异,其中以MS+ZT(1.0mg/L)+IAA(0.1mg/L)的诱导效果最佳,该处理组外植体的出愈率为100%,出芽率为95.56%;所有添加激素处理组的出愈率和出芽率均大于不添加任何激素的对照处理组,这说明添加激素能明显提高番茄外植体的诱愈率和诱芽率。11个不同浓度的IAA和NAA对番茄芽梢生根的结果表明:添加微量的生长素IAA或NAA能极大的提高番茄外植体的生根率,但不同处理之间差异显著,其中添加0.15mg/L IAA的生根率最高,20d后的生根率达到100%,平均出根数为45.73,绝大多数可以发育成正常植株;而未添加生长素的对照组,少数芽梢能生根,但生根缓慢,很难长出完整的根系;多数芽梢基部膨大并无根系生成,并逐渐黄化萎蔫死亡。因此,在1/2 MS培养基中添加0.15mg/L的IAA能获得根系发达、生长健壮的再生番茄植株。
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