【摘 要】
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目的:研制血管内皮生长因子检测试剂盒(酶标法),用于类风湿性关节炎的临床诊断。方法:以～株抗血管内皮生长因子特异性单克隆抗体作为捕获抗体,另一株单抗作为检测抗体,棋盘滴
【机 构】
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北京生物制品研究所 第三研究室; 北京健平九星生物医药科技有限公司;
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目的:研制血管内皮生长因子检测试剂盒(酶标法),用于类风湿性关节炎的临床诊断。方法:以～株抗血管内皮生长因子特异性单克隆抗体作为捕获抗体,另一株单抗作为检测抗体,棋盘滴定确定抗体使用浓度。制备VEGF165参考品,对样品稀释液、封闭液等实验条件进行优化。对试剂盒进行分析性能评估确定其质控标准。通过临床试验验证其在类风湿性关节炎检测中的有效性。结果:棋盘滴定确定捕获抗体浓度为10μg/mL,酶标抗体1;20 000应用,冻干VECF165参考品含量720～880 pg/mL,变异系数<10%。5%BSA作为封闭液和样品稀释液,试剂盒线性范围0～400 pg/mL,最低检出量0 pg/mL,不同浓度样本批内精密度9.83%～13.73%,不同时间批内精密度5.47%～14.08%,批间精密度7.88%,准确性94%～105%,特异性良好,效期末产品各项指标符合标准。确定了正常人VEGF参考范围:<142.2 pg/mL,作为判断类风湿性关节炎活动期指标灵敏度为70.5%,特异性80%。结论:成功研制了血管内皮生长因子检测试剂盒,完成临床试验评价。
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