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背景:恶性胞瘤严重危害人类健康,目前各种治疗方法的效果均不理想。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)是肿瘤坏死因子(TNF)超家族中的一员,它能诱导多种肿瘤细胞发生凋亡,而对正常细胞无明显毒性作用,这一特性使之成为肿瘤治疗研究中的热点。然而研究结果表明,部分肿瘤细胞对TRAIL诱导凋亡发生抵抗,但其抵抗的分子机制尚未清楚。前期研究,我们制备了10株全人源抗人TRAIL Receptor-1(TR1)的单克隆抗体,并发现部分抗体提高TRAIL诱导细胞凋亡作用。目的:利用10株TR1抗体筛选具有增强TRAIL诱导细胞凋亡的抗原表位,阐明TR1抗体协同TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡作用机制和TRAIL耐药机制。方法:通过竞争ELISA方法,分析TRAIL对10株抗体与TR1结合的影响;细胞凋亡实验观察不同抗原表位抗体对TRAIL诱导凋亡的敏感性影响;细菌展示技术结合流式细胞仪筛选TR1抗体的抗原表位,确定TRAIL敏感和耐药表位;通过TR1修饰后蛋白表达及其变异体的检测,探讨抗体联合TRAIL对肿瘤细胞敏感性影响及其耐受机制研究。结果:竞争ELISA结果显示10株抗体中TR1-407,-412,-417,-422和-438五株抗体可与TRAIL竞争结合TR1,而TR1-401,-404,-416,419和272抗体不与TRAIL竞争结合TR1,并显示可能存在5个不同的抗原表位的抗体群;TR1-404,-416和-419抗体可以促进TRAIL诱导细胞凋亡,且TR1-272抗体的抗原表位暴露对抗体提高TRAIL诱导凋亡有影响;应用细菌展示技术筛选功能性抗体的表位中,我们初步确定了有较强协同TRAIL诱导细胞凋亡的抗体TR1-419的抗原表位,位于TR1胞外区的第143-173aa内,为下一步探讨TRAIL的耐药机制奠定了良好得基础。结论:10株抗体有TR1-404,-416和-419促进TRAIL诱导细胞凋亡的能力且与TR1-272抗体表位具有密切相关性,但TR1-272是否可用于肿瘤细胞对TRAIL的敏感性预测指标有待更深入研究;另外,TR1-419抗体的抗原表位是否可能成为敏感表位尚需进一步证明。