基于生物膜色谱技术的人参类药材特征指纹图谱研究

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细胞膜色谱(cell membrane chromatography,CMC)是将细胞膜结合到硅胶表面,制成细胞膜固定相,利用色谱技术研究药物与受体相互作用规律的受体动力学方法。本研究将细胞膜色谱技术与中药多指标定量指纹图谱技术结合,比较生晒参、西洋参和三七等四种人参属药材心肌保护作用的药效物质基础。人参(Radix et Rhizoma Ginseng)、西洋参(Radix Panacis Quinquefolii)和三七(Radi et Rhizoma Notoginseng)为五加科人参属植物人参、西洋参和三七的干燥根或根茎,人参皂苷类成分为人参属药材的主要活性成分,具有多种药理活性,如抗氧化、延缓衰老、提高记忆力及机体免疫能力、心肌保护和抗肿瘤等作用。本研究采用正常/损伤小鼠离体心肌组织比较细胞膜色谱技术与液质联用技术结合,对人参总皂苷提取物中抑制阿霉素诱导心力衰竭有效成分进行筛选和鉴定。鉴定出6种潜在有效成分,其与心肌细胞膜上受体结合能力:人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd、三七皂苷R1>人参皂苷Rf>人参皂苷Rg1、人参皂苷Re。从结构上看人参皂苷Rg1和人参皂苷Re属于人参二醇型皂苷,而人参皂苷Rb1和Rd属于人参三醇型皂苷,以上研究结果提示采用阿霉素诱导心肌组织损伤体外模型细胞膜有可能特异性区分人参二醇型皂苷和人参三醇型皂苷。人参二醇型皂苷与人参三醇型皂苷类成分在细胞膜色谱上保留行为不同提示他们生物活性的差异。进而采用UHPLC建立人参属药材人参、红参(人参的炮制加工品)、三七和西洋参中皂苷类成分指纹图谱,定量测定了6种主要人参皂苷类成分(三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1和Rd)的含量。整合细胞膜色谱与定量指纹图谱分析结果,最终建立了人参类药材生物活性指纹图谱,为人参属药材化学品质比较和评价提供了新的思路和方法。
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