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目的:通过体外实验建立类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)培养体系,观察蠲痹强骨方含药血清对RA-FLS分泌炎症及骨破坏介质以及对中性粒细胞趋化作用的的影响,探讨其作用机制,为临床提供实验依据。方法:收集人工关节置换的RA患者的关节滑膜,采用胶原酶消化法原代培养,当FLS生长至3-5代进行实验,分别使用不同浓度的蠲痹强骨方含药血清(5%、10%、20%)和对照组血清(生理盐水灌胃组)体外作用于FLS。采用ELISA检测FLS上清中炎症细胞因子IL-6、IL-8、Cyr61蛋白表达情况,采用RT-PCR检测RA-FLS分泌的炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8、Cyr61 mRNA及骨破坏细胞因子RANKL/OPG、MMPs mRNA的表达情况;采用共聚焦显微镜观察蠲痹强骨方含药血清对中性粒细胞趋化作用的影响。结果:1.蠲痹强骨方含药血清能够抑制炎症介质IL-6、IL-8、Cyr61蛋白及IL-1β、IL-6、IL-8、Cyr61 mRNA的表达(P<0.05),20%蠲痹强骨方含药血清能够抑制中性粒细胞趋化;2.蠲痹强骨方含药血清能够抑制RA-FLS的迁移及RANKL、MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-9、MMP-13mRNA的表达,上调OPG mRNA的表达(P<0.05)。结论:不同蠲痹强骨方含药血清能够抑制RA滑膜炎症,其机制可能是通过抑制炎症细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、Cyr61的表达及中性粒细胞的趋化实现的;不同蠲痹强骨方含药血清能够抑制RA骨与软骨破坏,其机制可能是通过抑制RA-FLS迁移及RANKL、MMPs mRNA表达,上调OPG mRNA实现的。