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目的观察人羊膜间充质干细胞(h AMSC)对免疫性、氧化应激性和化疗药物损伤性卵巢早衰(POF)的治疗效果和作用机制。方法 ZP3皮下注射、局部双氧水处理和大剂量顺铂处理建立POF模型。hAMSC尾静脉一次注射和雌二醇(E2)灌胃给药。阴道涂片监测动情周期,称重法计算脏器指数。ELISA检测E2、卵泡刺激激素(FSH)、抗苗勒氏激素(AMH)和透明带糖蛋白抗体(AZPAb),评价卵巢功能。HE染色观察卵巢和子宫组织病理学。流式细胞术检测分析脾细胞中T细胞亚群变化。定量PCR和免疫组化染色分别检测卵巢组织基因mRNA和蛋白表达水平,卵巢组织冰冻切片,荧光显微镜下观察PKH26标记hAMSC的定植分布。结果第3代hAMSC呈长梭形、漩涡状贴壁生长,hAMSCs的CD44,CD73,CD90,CD105和波形蛋白阳性表达率大于95%,CD11b,CD19,CD34,CD45和HLA-DR阳性表达率之和<2%。POF小鼠(模型组)出现明显动情周期紊乱,治疗6周,乙烯雌酚治疗组(E2组)小鼠一直处于动情期,而hAMSC移植治疗组(hAMSC组)动情周期逐渐恢复(P<0.05)。与模型组相比,hAMSC和E2组小鼠卵巢指数和子宫指数明显升高,而脾脏指数下降(P<0.05),h AMSC治疗组的生育率恢复达正常组水平。hAMSC组和E2组小鼠血清E2和AMH水平显著升高,FSH和AZPAb水平明显下降(P<0.05)。模型组小鼠卵巢组织中含有大量闭锁卵泡和间质纤维化改变,子宫内膜层和肌层变薄,腺体数量减少;E2组仅有少量发育较好的卵泡,子宫内膜增厚且腺体增多,hAMSC组卵巢组织中可见成熟卵母细胞等数量较多的不同发育阶段的卵泡,子宫内膜和肌层增厚,有大量腺体。与模型组比较,hAMSC组和E2组治疗后的免疫性POF小鼠脾细胞中CD3+CD4+/CD3+CD8+和Treg/Th17细胞比例明显升高(P<0.05),Treg细胞的标志基因Foxp3和TGF-β1mRNA表达上调,而Th17的标志基因RORγT和IL-17a表达下调,卵泡发育相关的基因GDF-9和FOXL2 m RNA表达明显增高(P<0.05),均与正常组相当。与模型组和E2组比较,hAMSC治疗的氧化应激与化疗药所致POF小鼠卵巢组织中FSHR,VEGF和IGF-1蛋白表达水平高于模型组和E2组,但TNF-α和IL-1β蛋白明显降低,FOXL2,Oct4,GDF-9和LIF mRNA水平增高,而SCF水平降低。结论 h AMSC移植对ZP3诱导、氧化损伤和化疗药所致POF均具有明显治疗作用,且疗效优于E2;hAMSC可能通过恢复CD4+/CD8+及Treg/Th17平衡,改善卵巢局部卵泡发育微环境,减轻炎症反应,而促进受损卵巢的功能恢复。