枯草芽胞杆菌9407是一株从苹果植株中分离到的生防菌,对苹果轮纹病和甜瓜果斑病具有良好的防治效果。通过对已构建的枯草芽胞杆菌9407 TnYLB-1转座子突变体库的筛选,我们获得一株生物膜形成能力显著下降的突变体。经Southern杂交验证该突变体为TnYLB-1单拷贝插入菌株。反向PCR验证TnYLB-1插入到pnpA基因ORF区。该基因编码多核苷酸磷酸化酶(PNPase),该酶具有3′-5′核糖核酸外切酶活性,参与RNA的降解。pnpA缺失菌株swarming、生物膜形成能力均下降,对甜瓜果斑病菌的拮抗能力下降。β-半乳糖苷酶活性检测实验显示,pnpA能够影响生物膜基质胞外多糖eps基因、胞外蛋白tasA基因的表达;不影响abrB、sinI、sinR的表达,互补实验发现abrB、sinI、sinR互补菌株生物膜形成能力没有恢复;影响spoOA的表达,但互补spoOA生物膜形成能力并没有恢复,说明spoOA并不是pnpA调控生物膜形成的主要途径。目前,我们正在通过构建pnpA缺失菌株的TnYLB-1突变体库,通过报告系统寻找受pnpA调控的下游基因,以解析pnpA调控生物膜形成的机制;同时,检测pnpA缺失菌株在甜瓜根和叶中的定殖情况以及对甜瓜果斑病菌的生物防治效果,从而进一步阐明pnpA在生防中发挥的作用。