检测化学物质眼刺激性的传统试验是Draize等提出的兔眼实验,Draize实验作为测定眼刺激性的国际标准被长久使用到现在。近年来,随着对动物保护呼声越来越高,一些国际组织和国家也在不断的鼓励发展替代（体外）试验。迄今为止,还没有单一的体外试验可完全替代Draize实验,因此将不同性质的多个体外试验方法组合,分阶段的检测眼刺激性是非常有效的。在本研究中,我们利用以Draize试验结果为依据的GHS分类作为对照,验证了使用由花王开发的兔眼角膜细胞的Short Time Exposure Test短时暴露试验（以下STE试验）,人角膜上皮模型的EpiOcular试验(以下EpiOcular^TM试验)以及牛角膜混浊渗透性实验（以下BCOP试验）的组合试验体系的有效性。为了验证本试验组合对于眼刺激性评估的有效性,我们选择了113种不同化学物质进行了验证。我们以STE试验中5%受试物五分钟暴露后的细胞生存率,以及EpiOcular^TM试验中未稀释受试物暴露后的细胞生存率为指标,对所有化学物的非刺激性和刺激性进行区分,以此作为第一阶段试验。另外,在第二阶段试验以BCOP实验中牛眼角膜的混浊性和渗透性为指标,对被测化学物的强刺激性和非强刺激性进行区分。在本组合试验体系中,首先将可溶解于STE溶剂中的受试物应用STE试验,非溶解受试物应用EpiOcular^TM试验来区分受试物刺激性和非刺激性。其次,对被区分为刺激性物质的化学物进行BCOP试验,来区分其是否为强刺激性物质。同时,明确STE试验的适用边界,对于STE适用范围外的化学物质应用EpiOcular^TM试验进行鉴定。结果表明,STE适用范围外的13种化学物质中,有11种物质利用EpiOcular^TM试验得到了正确分类。最终,对于113种化学物质的GHS眼刺激性3种分类的预测性达到74%,过小评估率8.0%,过大评估率为17.7%。综上所述,利用STE试验、EpiOc-ular^TM试验以及BCOP试验的3种体外试验法进行阶段性的组合试验,不仅可以对广泛范围的化学物质进行评估、并且是预测GHS的眼刺激性区分的有效手段。