芒果苷降低金黄色葡萄球菌感染诱导的细胞凋亡

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[目的]金黄色葡萄球菌是目前最难以对付的病菌之一。它可以感染动物表皮、软组织、黏膜、骨和关节,严重可造成动物败血症,甚至死亡,给畜禽养殖业造成严重的经济损失。近年来,抗药性金黄色葡萄球菌传染更加严重,已成为公共卫生威胁。芒果苷是中药知母中的活性成分,属于双苯吡酮类黄酮化合物,具有抗炎,抗菌,抗氧化应激的作用。本研究主要通过金黄色葡萄球菌感染小鼠巨噬细胞系(RAW264.7)诱导其细胞凋亡,探究芒果苷在金黄色葡萄球菌引起的细胞凋亡的调控机制,为临床预防和治疗金黄色葡萄球菌感染提供参考。[方法]本研究采用MTT法检测芒果苷对细胞的药物毒性,筛选最适药物浓度;ELISA检测芒果苷对细胞因子TNF-α,IL-6和IL-10的分泌的作用效果;Western-blot检测芒果苷对细胞中Bax,Bcl-2,和Caspase-3的蛋白水平以及相关信号通路的作用效果;DCFH-DA和DAPI联合染色检测芒果苷对细胞氧化损伤产生ROS的作用效果。[结果] ELISA结果显示金黄色葡萄球菌作用细胞后显著提高了细胞因子TNF-α,IL-6和IL-10的表达;Western-blot结果显示金黄色葡萄球菌作用细胞后可显著提高细胞中Bax,和Caspase-3的蛋白水平,而加入不同浓度(25μM、50μM、100μM)芒果苷后则显著抑制Bax,和Caspase-3的表达,并呈现剂量依赖性。DCFH-DA和DAPI联合染色结果显示金黄色葡萄球菌作用细胞后产生大量ROS,而芒果苷不同浓度作用后改善了ROS产生量。Westernblot结果显示金黄色葡萄球菌作用细胞后对JNK信号通路蛋白有明显的激活,而芒果苷不同浓度作用后则显著抑制了通道蛋白的表达。[结论]芒果苷可以通过抑制JNK/Bax通路抑制金黄色葡萄球菌引起的细胞凋亡。
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