【摘 要】
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目的寻求有效的抗SARS病毒的重组BCG疫苗并观察其诱导的免疫效应及评价其可能的病理损害。方法以大肠杆菌—分枝杆菌穿梭表达质粒构建表达SARS病毒膜蛋白(M蛋白)的重组BCG疫
【机 构】
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Research Base in Shenzhen Center for Disease Control and Prevention,Basic Medicine Postdoctoral Mobi
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目的寻求有效的抗SARS病毒的重组BCG疫苗并观察其诱导的免疫效应及评价其可能的病理损害。方法以大肠杆菌—分枝杆菌穿梭表达质粒构建表达SARS病毒膜蛋白(M蛋白)的重组BCG疫苗,转化BCG后免疫BALB/c小鼠,观察其诱导的抗SARS病毒特异性免疫效应:(1)体液免疫:ELISA法动态观察免疫小鼠血清中IgG及其亚类水平,Western blot分析抗M蛋白特异性抗体;(2)细胞免疫:MTT法测定T淋巴细胞增殖能力,ELISA法检测脾细胞经刺激诱导后分泌的细胞因子IFN-γ(Th1型)和IL-4(Th2型)水平,流式细胞术分析脾脏T淋巴细胞CD4~-/CD8~-亚群。以免疫小鼠的的肝脏和肺脏的菌落计数及肺组织切片的病理学观察来评价重组BCG的毒力。结果成功构建SARS病毒M蛋白的重组BCG疫苗,接种后可诱导小鼠产生抗SARS-Cov M蛋白的特异性IgG抗体,淋巴细胞增殖明显,CD4-T淋巴细胞亚群比例增高,细胞因子IFN-γ分泌水平显著上升。毒力检测结果示实验组和对照组间无显著差异。结论 BCG-M疫苗可诱导BALB/c小鼠产生包括体液和细胞免疫的全面的免疫应答,免疫反应倾向于Th1型。
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