【摘 要】
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子宫内膜癌是最常见的女性生殖系统恶性肿瘤之一,且近年来发病率有逐年升高的趋势,其发病机制尚未完全阐明。MicroRNAs(miRNA)是一类保守的、长度约22nt的内源性单链非编码小
【机 构】
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大连医科大学基础医学院生化教研室;
【基金项目】
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supported by National Natural Scientific Grantsof China(No.31570798);the program for professors of special appointment in Liaoning province;the Postdoctoral Science Foundation of China(201602233、2016
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子宫内膜癌是最常见的女性生殖系统恶性肿瘤之一,且近年来发病率有逐年升高的趋势,其发病机制尚未完全阐明。MicroRNAs(miRNA)是一类保守的、长度约22nt的内源性单链非编码小分子RNA,其参与细胞分化、凋亡、增殖,并与肿瘤发生密切相关。细胞周期相关转录因子E2F1的活化可将信号传至核内,推动细胞周期由G1期进入到S期,调控细胞周期进程。近年研究发现,E2F1也参与肿瘤细胞代谢重编程,在肿瘤的发生、发展中起到重要作用。根据文献提示E2F1是mir223的靶点,mir223缺失的小鼠中E2F1蛋白表达上调。本研究以子宫内膜癌临床样本及人子宫内膜癌细胞系,检测mir223的差异表达,分析mir223与子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、迁移的关系。检测mir223与E2F1之间靶向关系,揭示mir223与子宫内膜癌细胞发生的相关性。研究结果显示:应用Real-time检测临床子宫内膜癌手术样本与癌旁组织对比miR-223表达降低且差异表达显著,免疫组化及Real-time检测E2F1在子宫内膜癌中异常高表达。TargetScan5.1获得miR-223的潜在靶基因信息,构建miR-223过表达慢病毒载体,转染人子宫内膜癌细胞RL95-2细胞,应用western blot、RT-PCR、免疫组化加测上调RL95-2上皮细胞系中miR-223,预测靶基因IGF-1R、FOX01、E2F1的mRNA和蛋白表达水平,荧光素酶报告实验明确miR-223在子宫内膜上皮细胞中与IGF-1R、E2F1存在靶向基因关系;CCK8、Transwell及细胞划痕实验检测上调RL95-上皮细胞系中miR-223可抑制子宫内膜癌细胞的增殖能力、迁移及侵袭能力,分子机制进一步研究中。
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