目的:通过构建人端粒酶逆转录酶N-端(hTERT-n)蛋白原核表达系统(前期工作),并分离提纯获得高纯度的hTERT-n蛋白,以该蛋白为抗原利用间接ELISA技术检测癌症患者、良性疾病患者和正常血清中抗hTERT自身抗体水平,为血清抗hTERT自身抗体能否作为一种新的肿瘤标志物提供实验依据。方法:1.重组表达菌pMAL-c5X-hTERT-n-TB1经0.3 mmol/L IPTG诱导表达目的蛋白,12%SDS-PAGE初步验证目的蛋白表达情况;2.用直链淀粉树脂层析柱和BioLogic DuoFlow蛋白纯化仪提纯目的蛋白,经SDSPAGE、Western blot、考马斯亮蓝染料结合法鉴定蛋白大小和测定蛋白质浓度。3.间接ELISA法检测239例肺癌、215例乳腺癌、123例直肠癌、122例结肠癌、105例肺炎患者和120例正常人血清抗hTERT-n自身抗体的水平,检测结果进行统计分析,比较抗hTERT-n自身抗体水平在不同种类癌症、不同病理类型、不同分期和不同年龄段的差异。结果:①成功获得高纯度重组hTERT-n蛋白,浓度为1.0 mg/mL;②间接ELISA法检测血清抗hTERT-n自身抗体结果发现:正常对照组、肺炎组和肺癌组血清抗hTERT-n自身抗体测定浓度(X±SE)分别为4.67±0.19、5.86±0.28和6.95±0.20;肺癌组和肺炎组高于健康对照组(P<0.05),肺癌组与肺炎组差别有统计学意义(P<0.05);在不同病理类型肺癌中,血清抗hTERT-n自身抗体的水平也有差别,肺鳞癌患者血清中该抗体水平为9.50±0.25,高于肺腺癌患者(6.84±0.24),差别有统计学意义(P<0.05);乳腺癌、直肠癌、结肠癌组血清抗hTERT-n自身抗体测定浓度(X±SE)分别为6.53±0.21、7.47±0.31和6.76±0.27;后三组与正常组比较差别有统计学意义(P<0.05),与肺炎组差别有统计学意义(P<0.05);且该抗体的水平与肿瘤分期有关,中晚期肿瘤患者抗体水平明显高于早期肿瘤,P<0.05;年龄因素对该抗体水平无影响。结论:癌症组患者血清抗hTERT-c自身抗体水平明显高于良性疾病组和正常对照组,差别有统计学意义,提示血清抗hTERT-c自身抗体可做为一项新的广谱肿瘤标志物。