论文部分内容阅读
酪蛋白磷酸肽是一类具有二价金属元素螯合活性的多肽集,酶解酪蛋白获得酪蛋白磷酸肽(CaseinPhosphopeptides,简称CPP),通过连续色谱手段分离出高螯合锌活性的肽,再通过结构表征研究其螯合锌离子的特性。采用碱性蛋白酶酶水解酪蛋白制备酪蛋白磷酸肽,通过Q强阴离子交换色谱、透析和C18反相制备色谱连续分离酪蛋白磷酸肽,得到特异性锌螯合肽。运用核磁共振氢谱、磷谱以及红外光谱表征分析肽螯合锌离子的特性。结果表明,设计的连续色谱方案,可从酪蛋白酶解液中获得高螯合锌能力的酪蛋白磷酸肽,命名为CP-18,其锌螯合活性达88.68ug/mg。表征分析发现螯合前后CPP结构变化明显,酪蛋白磷酸肽链中的磷酸丝氨酸残基可能是螯合锌离子的主要基团,其主要结合位点是-COOH中的羰基及-NH2。试验研究结果为高活性酪蛋白磷酸肽锌制备提供理论依据。