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目的观察衣霉素诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及自噬的作用,并初步探究其凋亡及自噬的机制。为研究衣霉素导致人肝癌HepG2细胞具体凋亡、自噬通路奠定基础。方法以人肝癌细胞系HepG2细胞系为细胞模型,不同剂量衣霉素攻毒24,36和48 h后,通过Hoechst-PI荧光染色法和流式细胞术检测衣霉素引起的HepG2细胞凋亡现象。用罗丹明123检测攻毒后HepG2细胞线粒体膜电位,Western blot检测CHOP、胱天蛋白酶3、胱天蛋白酶9、胱天蛋白酶8、胱天蛋白酶12、PARP、BAX、AIF蛋白表达水平。以人肝癌细胞系HepG2细胞系为细胞模型,不同剂量衣霉素攻毒6,12和24 h后,采用MDC染色,荧光显微镜观察自噬囊泡,流式细胞术检测其荧光强度。pGFP-LC3质粒瞬时转染HepG2细胞,衣霉素处理后,荧光显微镜检测自噬。Western blot检测LC3 I/II,beclin1,DAPK1蛋白表达水平。结果 Western blot实验检测CHOP蛋白呈时间、剂量依赖性增加,说明衣霉素引起HepG2细胞内质网应激程度呈时间、剂量依赖性增加。凋亡检测表明,随衣霉素作用时间及剂量的增加,细胞凋亡现象明显增加。衣霉素可能通过胱天蛋白酶依赖性的线粒体凋亡途径诱导HepG2细胞凋亡。主要表现在:PARP、BAX、胱天蛋白酶12表达量呈时间、剂量依赖性增加,胱天蛋白酶9前体、胱天蛋白酶3前体表达呈时间、剂量依赖性减少。剪切体胱天蛋白酶8只呈现出一定程度的时间相关性增加。攻毒后HepG2细胞线粒体膜电位呈剂量依赖性降低。衣霉素攻毒HepG2细胞后,其自噬囊泡增多,MDC染色强度呈时间、剂量依赖性增加。GFP-LC3在攻毒细胞组中出现明显点状聚集,其数量呈时间依赖性增加。LC3Ⅰ/LC3Ⅱ表达量比值呈时间、剂量依赖性减少,beclin1,DAPK1表达量呈时间、剂量依赖性增加。说明衣霉素可能通过DAPK1依赖性通路引起细胞发生自噬。结论衣霉素可能通过引起内质网应激后激活胱天蛋白酶依赖性的线粒体途径诱导HepG2细胞凋亡,同时通过激活DAPK1引起HepG2细胞自噬。