T-DNA插入突变是快速构建植物突变体库的重要手段,在拟南芥和水稻突变体库的构建中已成功应用。因此可利用T-DNA插入突变构建黄瓜突变体库,获得性状稳定并可遗传的突变体,为黄瓜的基因功能研究提供突变材料。通过TAIL-PCR或反向PCR可获得T-DNA插入位点的侧翼序列,之后利用序列比对软件在黄瓜基因组全序列中预测T-DNA插入的位置,进一步通过生物信息学分析获得候选基因。本研究以本实验室已经建立的农杆菌介导的遗传转化的基础上创制T-DNA插入突变体,获得T0代植株并通过单株自交和抗性筛选得到T1植株。对T0和T1代植株的整个生长发育时期进行突变性状观察和鉴定。通过农杆菌介导的遗传转化体系共得到106株T0代植株,并通过单株自交收获82个编号的T0代植株种子,之后对部分T0代种子进行抗性筛选得到T1代植株。通过对T0代植株进行的突变性状统计观察,初步发现了复雌花、茎融合、多种叶型变异以及花粉败育等突变表型。通过提取植株DNA并设计引物进行PCR验证,初步鉴定了部分具有突变表型的T0代植株。下一步计划进行T1代植株的突变表型观察统计以及探究T0代突变表型的遗传稳定性,并对具有重要意义的突变表型植株进行southern blot验证其拷贝数以及TAIL-PCR获得相关突变表型的侧翼序列信息,为之后基因功能的研究奠定基础。