目的:癌基因Pim1参与多个信号转导通路,与肿瘤的发生发展密切相关。本实验研究人Pim1基因启动子区Rs3818815位点单核苷酸多态性对Pim转录的影响,进一步研究Pim1基因启动子区SNP对肿瘤发生发展的影响。方法:构建含有人Pim1基因启动子区的荧光素酶报告基因质粒。以人基因组DNA为模板,进行Pim1基因启动子区的PCR扩增,用p MD18-T simple vector进行TA克隆并测序。再将目的基因克隆到p GL3荧光素酶报告基因载体质粒中,采用点突变法构建Pim1启动子突变型质粒,酶切分析,并测序鉴定。转化293T细胞,测定荧光素酶表达变化。结果:成功构建了带有Pim1的5’-UTR区荧光素酶报告基因质粒。同时构建了相应的带有Rs3818815位点的p GL3-Pim1-pro突变型质粒,测序鉴定正确。转染293T细胞后,测定荧光素酶报告基因活性,两种质粒的荧光活性强度存在差异。结论:成功构建了带有Rs3818815位点的p GL3-Pim1野生型和突变型质粒,Rs3818815对Pim1转录活性的影响存在差异。