如今,越来越多的虹彩病毒已经测定了全序列,但是由于在虹彩病毒中缺乏一个稳定有效的基因功能研究系统,许多病毒编码的蛋白的功能仍然是未知的。在本研究中,我们将大肠杆菌的乳糖操纵子系统整合到了沼泽绿牛蛙虹彩病毒(Rana grylio virus,RGV)的基因组中,得到了一株基因可诱导表达的重组虹彩病毒。首先,我们将乳糖操纵子的阻遏蛋白(lac repressor,lacl)基因和绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP)基因插入到RGV的胸苷激酶(thymidine kinase,TK)位点中,通过绿色荧光筛选,得到了一株命名为RGV-lacl的重组病毒。RGV-lacl能够表达有活性的lacl蛋白,并且和野生型的RGV有相同的生长曲线。在此基础上,我们将一个包含了乳糖操纵基因(lac operator,lacO)的启动子和红色荧光蛋白(red fluorescence protein,EGFP)基因插入到RGV-lacl的病毒囊膜蛋白53R(viral envelope protein 53R)基因翻译起始位点之前,得到了一株命名为△53R-RGV-laclO的重组病毒。重组病毒△53R-RGV-laclO含有lacl和lacO的序列,在存在异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)的条件下,通过绿色和红色荧光筛选并纯化,在有IPTG存在时,重组病毒△53R-RGV-laclO和野生型RGV有相似的特征.但是,在没有lPTG时,重组病毒△53R-RGV-laclO诱导细胞病变和形成空斑的数量大大降低.此外,通过Western分析,证实在没有IPTG时,病毒囊膜蛋白53R的表达水平也显著降低.以上结果说明大肠杆菌的乳糖操纵子系统在虹彩病毒中是有功能的,并且该系统是研究虹彩病毒基因功能一个有力的工具。这是有关含有乳糖操纵子系统的重组虹彩病毒的首次报道。