【摘 要】
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线粒体是真核细胞重要的细胞器,在能量代谢和细胞死亡调控中都起着重要的作用。同时,线粒体也是高度动态的细胞器,在细胞内频繁地发生融合与分裂。线粒体的融合分裂与能量代
【机 构】
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厦门大学化学化工学院化学生物学系谱学分析与仪器教育部重点实验室化学生物学福建省重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金(91313302,90913015,21225523,216278111);国家基础科学人才培养基金项目(J1310024)的资助
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线粒体是真核细胞重要的细胞器,在能量代谢和细胞死亡调控中都起着重要的作用。同时,线粒体也是高度动态的细胞器,在细胞内频繁地发生融合与分裂。线粒体的融合分裂与能量代谢、自噬、凋亡等过程密切相关,且融合分裂的异常会导致人类多种疾病的产生,包括退行性疾病、心血管疾病和癌症等。因此,建立线粒体融合的定量检测方法对于探索融合与多种细胞生理活动的相互关系及疾病发病机制均具有重要意义。荧光显微镜和透射电子显微镜是线粒体融合研究的常用检测手段,但两者均不具备高通量特性,难以实现定量分析,且操作困难繁琐。基于实验室自主研发的超高灵敏流式检测装置在单线粒体多参数高通量检测中的优势[1][2],我们采用质粒稳定转染的线粒体荧光标记手段,建立了线粒体融合的高通量定量检测方法,并将其应用于线粒体融合与凋亡可逆之间的相互关系探索。实验结果表明虽然融合有利于线粒体稳态的维持,但是也使线粒体对凋亡产生抗性,促进凋亡可逆,导致细胞对抗癌药物产生耐药性。此外,我们利用所建立的方法,探索处于不同信号转导途径的胞浆蛋白对线粒体融合的影响,以期发现新的融合调节因子,为线粒体融合机理的进一步阐明及疾病发病机制的研究提供实验依据。
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