研究背景:胰腺癌作为死亡率最高的癌症之一,死亡率与发病率的比例高达0.98,五年生存率仅为5%。临床常用的肿瘤血清学诊断指标如CA19-9,CA125,CEA等在胰腺癌早期诊断中,不仅检出率低,且在良性胰腺疾病以及其他癌症中均有一定检出率,特异性和灵敏度较差。寻找胰腺癌发病早期的特异性诊断分子是目前亟待解决的问题。由于免疫系统对细胞癌变的响应在癌症早期就已经发生,有时会伴随肿瘤细胞特殊成分而产生对应自身抗体,因此,胰腺癌病人血清中存在的自身抗体,有可能作为其早期诊断的潜在标志物。研究目的:使用多种癌细胞系的全蛋白作为自身抗原筛选来源,用胰腺癌病人血清中的自身抗体识别其对应靶抗原,运用蛋白质组学方法鉴定出胰腺癌相关自身抗原。方法:培养多种癌细胞系,使用1 0个胰腺癌混合血清作为实验组,1 0个健康人混合血清作为对照组,对这些癌细胞全蛋白裂解液进行免疫印迹(WB)初筛实验,选出与胰腺癌血清有阳性反应的细胞系。对阳性细胞系进行WB实验,将识别出的阳性条带通过MALDI-TOF/TOF质谱进行序列鉴定,通过比对蛋白数据库得到胰腺癌可疑自身抗原的序列。结果:混合血清WB初筛中,显示BxPC3,A549细胞裂解液与胰腺癌混合血清有阳性反应。将这两个细胞系进行WB实验;在BxPC3细胞中,得到70 kD和100 kD的阳性条带;在A549细胞中,得到30 kD、70kD、90 kD和100 kD的阳性条带,阳性率均达到20%以上。对这6个条带进行质谱鉴定,得到USTB40-45号(本实验室编号)蛋白。6个自身抗原蛋白中有1个(ANXA2)与已有报道吻合,5个蛋白在胰腺癌中为首次发现。结论:本研究使用蛋白质组学方法,在癌细胞系中成功筛选得到6个胰腺癌相关的自身抗原,在进一步ELISA大样本验证以后,可作为潜在的胰腺癌相关分子与临床血清学指标建立联合检测方案,探索其诊断价值。