目的:建立大鼠血浆中荷叶碱的HPLC测定方法并进行大鼠体内药代动力学研究。方法:内标为丹参酮ⅡA,采用乙酸乙酯液-液萃取法提取大鼠血浆样品的荷叶碱。HPLC测定大鼠血浆中荷叶碱的含量,优化的色谱条件如下:Sinochrom ODS-BP色谱柱（5μm,250 mm×4.6 mm）;流动相:乙腈-水-冰醋酸-三乙胺（40:60:0.5:0.43）;流速:1.2 mL/min;柱温:35℃;进样量:20μL;紫外检测波长:272 nm。大鼠尾静脉给予10mg/kg荷叶碱后,在不同时间点取血并分离血浆,测定血浆荷叶碱浓度,DAS软件计算药动学参数。结果:大鼠血浆中内源性物质不干扰荷叶碱的测定,血浆中荷叶碱在0.375～24.0μg/mL浓度范围内线性关系良好（R²=0.9995）,最低检测限为0.19μg/mL,荷叶碱在大鼠血浆中的提取回收率为86.4%～96.97%,日内和日间差异RSD均小于7.0%。血浆样品的荷叶碱在室温及4℃下放置12小时、-40℃贮存3周及冻融3次均稳定。荷叶碱在大鼠体内的t_1/2β为1.73±0.58 h,V1为5.03±0.24 L/kg,CL为4.23±0.78 L/h/kg,AUC_（0-∞）为2.35±0.46 mg/L·h,MRT_（0-t）为1.51±0.31 h。结论:本实验方法简便,专属性强,检测灵敏度高,适用于荷叶碱的大鼠体内的药代动力学研究,荷叶碱在大鼠体内符合二室模型药动学特征。