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目的调查本地区1 d~3岁婴幼儿血清25-羟基维生素D3[25-(OH)D3]正常参考区间。方法依据CLSI C28-A3文件,选取2011年5月-2012年4月在杭州市余杭区妇幼保健院儿科门诊及新生儿科诊治的1 d~3岁健康婴幼儿2 027例。按年龄分成<1月、1-3月、4-12月、13-24月、25-36月共5组。按季节分成春季、夏季、秋季、冬季4组。按常规空腹禁食8~12 h后,抽取静脉血1~2 ml,分离血清后直接上机进行检测,采用Roche Cobas e601型全自动电化学发光免疫分析仪、原装配套25-(OH)D3试剂,检测其血清中25-(OH)D3水平,确定相应的参考区间。结果 2 027例1 d~3岁健康婴幼儿血清25-(OH)D3参考区间为30.70(12.17~81.63)ng/ml,男女性别之间比较,差异无统计学意义(Z=0.712,P=0.476)。不同年龄组之间比较,差异有统计学意义(χ2=93.401,P<0.001);新生儿出生时血清25-(OH)D3保持较高水平,29 d~3月有所回落,4~11月慢慢上升,至1岁时达最高水平,之后随着年龄的增长,血清25-(OH)D3水平逐渐下降,3岁后基本接近儿童水平。不同季节之间比较,差异有统计学意义(χ2=62.625,P<0.001)。春夏季健康婴幼儿血清25(OH)D3水平明显低于秋冬季。结论本研究初步了解本地区电化学发光免疫分析法检测婴幼儿血清25(OH)D3参考区间,为临床诊断维生素D缺乏提供科学依据。