论文部分内容阅读
目的:通过检测卵巢癌患者卵巢癌组织、大网及腹膜组织中VEGF、其受体Flt-1蛋白表达及血管生成情况,血清、腹水上清以及腹水沉淀细胞中VEGF表达情况,并与非卵巢癌患者进行比较,从而揭示VEGF与卵巢癌临床病理过程的联系及可能机制,进而为卵巢癌的诊断及治疗提供实验依据。方法:选择2006年1月至2008年1月在吉林大学第二医院进行住院治疗的手术患者:卵巢癌患者43例;卵巢良性肿瘤患者18例;对照组患者16例。所有患者均于第一次手术前抽取静脉血,存血清于-20℃待测。并于手术时切取卵巢肿瘤部位组织一块,非卵巢肿瘤患者任取卵巢组织一块,卵巢癌患者另留取大网膜组织和腹膜组织各一块,大小均约为1cm×1cm×1cm,以福尔马林固定,采用S-P免疫组化法检测卵巢、大网、腹膜等组织中VEGF、Flt-1蛋白的表达情况及血管生成情况;术中同时留取腹水20ml并抗凝,上清存于-20℃待测。采用ELISA法检测卵巢癌患者血清及腹水上清中VEGF蛋白的含量;腹水沉淀细胞立即进行流式细胞术免疫荧光强度检测。留取非恶性肿瘤患者的盆腔积液作为流式细胞术的对照组。其中包括了结核5例,良性卵巢肿瘤5例,盆腔炎性积液5例。结果:1.根据卵巢癌临床病理特性进行不同分组,各组VEGF及其受体Flt-1表达的阳性率比较:在卵巢癌组织中,Ⅲ-Ⅳ期患者VEGF及其受体Flt-1表达阳性率高于Ⅰ-Ⅱ期患者(P<0.05);腹水量>500ml者VEGF及其受体Flt-1表达阳性率高于<500ml者(P<0.05);有盆腹腔转移者VEGF及其受体Flt-1表达阳性率高于无盆腹腔转移者,具有显著性差异(P<0.05);而不同年龄组、不同组织学类型及不同病理类型之间各组VEGF及其受体Flt-1的表达无显著性差异(P>0.05)。在卵巢癌患者、良性卵巢肿瘤患者及对照组患者的卵巢组织中VEGF及Flt-1表达阳性率的比较:卵巢癌患者卵巢组织中,VEGF及Flt-1的表达阳性率高于良性肿瘤和对照组患者的卵巢组织(P<0.05)。良性肿瘤患者卵巢组织中VEGF及Flt-1的表达阳性率与对照组比较无显著差异(P>0.05)。在卵巢癌患者卵巢组织中,表达VEGF的细胞有癌细胞、血管内皮细胞及淋巴细胞。而在良性卵巢肿瘤的卵巢组织和对照组患者卵巢组织中,表达VEGF的细胞主要为血管内皮细胞。在这三组患者的卵巢组织中,表达Flt-1的细胞则主要是血管内皮细胞,部分卵巢癌细胞亦表达Flt-1。卵巢癌患者卵巢组织中微血管密度(MVD)、淋巴细胞VEGF表达情况与卵巢癌盆腹腔转移的关系:盆腹腔有转移的卵巢癌患者卵巢组织中,微血管密度高于无转移的卵巢癌患者的卵巢组织(P<0.05);盆腹腔有转移的卵巢癌患者卵巢组织中,淋巴细胞表达VEGF的阳性率高于无转移的卵巢癌患者的卵巢组织(P<0.05):2.对卵巢癌盆腹腔转移灶大网膜和腹膜组织进行研究中,按照有无癌转移灶进行分组,其VEGF及受体Flt-1表达的阳性率比较:腹膜组织有癌转移灶者VEGF及Flt-1表达阳性率高于无癌转移灶者(P<0.05);大网膜组织有癌转移灶者VEGF及Flt-1表达阳性率高于无癌转移灶者(P<0.05)。3.卵巢癌、良性卵巢肿瘤和对照组患者腹水上清和血清中VEGF蛋白的表达水平比较:卵巢癌患者腹水上清中VEGF蛋白浓度较血清中高(P<0.05);良性卵巢肿瘤腹水上清中VEGF蛋白浓度较血清中高(P<0.05);对照组腹水上清中VEGF蛋白浓度与血清无显著性差异(P>0.05);卵巢癌患者腹水上清中VEGF蛋白浓度分别高于良性卵巢肿瘤和对照组患者(P<0.05);良性卵巢肿瘤腹水上清中VEGF蛋白浓度高于对照组患者(P<0.05);卵巢癌患者血上清中VEGF蛋白浓度分别高于良性卵巢肿瘤和对照组患者(P<0.05);良性卵巢肿瘤血清中VEGF蛋白浓度与对照组患者比较无显著性差异(P>0.05)。4.卵巢癌患者血清VEGF、腹水VEGF与血清CA125表达情况的比较及其在卵巢癌诊断中的意义:血清CA125在卵巢癌诊断中的灵敏度和特异度分别为83.9%,90.9%。血清VEGF灵敏度为90.6%,特异度为39-3%:腹水VEGF的灵敏度和特异度分别为77.3%,93.9%。三者联合检测时,卵巢癌诊断的灵敏度提高至96.5%,特异度提高至93.9%。5.卵巢癌患者与非恶性肿瘤性腹水沉淀细胞VEGF表达情况的比较:卵巢癌性腹水沉淀细胞表达VEGF的阳性率高于非恶性肿瘤性腹水沉淀细胞(P<0.05)。其中相当一部分的淋巴细胞有VEGF表达。结论:1.对合并有腹水的患者除了进行腹水脱落细胞检查外,同时进行包括VEGF在内的的多指标联合检测,将有利于提高卵巢癌的术前诊断率,尤其是对于脱落细胞阴性的病例,更有鉴别意义。腹水VEGF检测对良恶性肿瘤亦有鉴别意义。对卵巢癌患者血清VEGF、腹水VEGF与血清CA125进行联合监测,诊断的灵敏度和特异度均明显提高。2.卵巢癌患者癌细胞、血管内皮细胞及淋巴细胞均可表达VEGF,癌细胞一方面分泌VEGF,另一方面使周围细胞肿瘤化,也分泌VEGE从而实现卵巢癌的局部浸润、扩散和转移。通过将VEGF分泌至腹水和血清中,并在癌细胞种植部位促进新生血管生成,进而形成大量腹水,并发生盆腹腔及远处转移。其中,卵巢癌组织和腹水中淋巴细胞表达VEGF,一方面参与肿瘤的浸润与转移,另一方面可能参与肿瘤的防御。3.VEGF高表达的卵巢癌患者,可能预后较差。监测血清VEGF将有利于观察肿瘤的消长与复发,了解患者的预后。