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研究目的:研究生物支架胶原蛋白结合中医外科治疗慢性创面经典方“生肌玉红膏”调节人源脂肪干细胞（hADSCs）旁分泌促进血管新生的体内外机制。研究内容:提取、分离、培养人来源的脂肪干细胞;制备和评测生肌玉红胶原;根据芯片结果结果和生物信息学分析,筛选生肌玉红原调控脂肪干细胞功能时,差异最大的小分子核糖核酸（microRNA;miRNA）和长链非编码核糖核酸（lncRNA）及他们与预测靶向蛋白p38之间的关系;裸鼠下肢缺血模型实验验证体外实验及部分前期实验所得结果。研究方法:1.胶原蛋白酶消化离心法分离提取人源性脂肪干细胞,诱导成脂、成骨、成软骨多向分化并染色鉴定,流式检测细胞表面抗原鉴定脂肪干细胞;2.用醇提法提取生肌玉红提取液,与胶原蛋白结合后评价其粘附率和对所提脂肪干细胞的增殖影响;3.RT-qPCR验证基因芯片分析的实验组中表达差异最显著的miRNA,慢病毒转染技术沉默该基因,荧光显微镜下观察GFP表达,检测miRNA和p38的表达水平,检验生肌玉红胶原对miRNA和p38表达的逆转作用;4.同筛选miRNA方法筛选基因芯片预测差异lncRNA中差异最显著的lncRNA,检测沉默miRNA后该lncRNA的表达情况,慢病毒转染技术沉默该lncRNA,检测其对miRNA和p38的表达水平的影响;5.建立裸鼠下肢缺血模型,分组给药28天,以周为时间节点,超声多普勒记录血流变化,病理监控其对动物内脏有无损伤,免疫组化检测局部血管新生状况,RT-qPCR检测局部组织样本中目标miRNA、lncRNA、靶向基因以及外泌体中这三者的表达水平。研究成果:1.所提脂肪干细胞有较好的多向分化能力,细胞表面抗原支持其定义为脂肪干细胞;2.生肌玉红胶原与脂肪干细胞黏附率90%以上,适合作为脂肪干细胞运用于组织工程的支架;3.生肌玉红胶原可能通过作用于脂肪干细胞的miR-21/lncRNATCONS00178845/p38信号调节通路发挥促血管新生作用,达到促进愈合的目的;4.以裸鼠为载体的局部实验验证了细胞实验所得信号通路的体内可行性,并且脂肪干细胞的促愈合作用可能是通过旁分泌外泌体携带相关调控因子至创伤部位来实现的。研究结论:脂肪干细胞通过旁分泌外泌体携带调控因子miR-21调控lncRNATCONS00178845 从而影响 miR-21/lncRNA TCONS00178845/p38 信号调节通路发挥促血管新生作用,达到促进愈合的目的。