【摘 要】
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应用单克隆抗体、噬菌体随机肽库、基因克隆表达及重组蛋白抗原性分析技术,进行猪瘟病毒A1 抗原亚区及E2、Erns蛋白中和表位基因定位研究,明确A1抗原亚区位于E2蛋白791-858位
【机 构】
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成都军区疾病预防控制中心军事医学研究所; 澳大利亚国家动物卫生实验室; 云南云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室;
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应用单克隆抗体、噬菌体随机肽库、基因克隆表达及重组蛋白抗原性分析技术,进行猪瘟病毒A1 抗原亚区及E2、Erns蛋白中和表位基因定位研究,明确A1抗原亚区位于E2蛋白791-858位氨基酸区域, E2蛋白的SPTTLR基序(832-837位氨基酸)构成猪瘟病毒特异性线性中和表位;基序的第1-3位氨基酸是构成表位的关键性氨基酸;第3位氨基酸(T)是表位与c2410和a18发生特异性结合的必需氨基酸, 而对WH303则不然。研究提示:同一表位在动物体内诱导产生的单克隆抗体不是唯一的,或针对同一表位的单克隆抗体不是唯一的,或SPTTLR基序及其侧翼序列构成2个或2个以上重叠表位。获得分别针对 1B5,b4-22和24／16的三个主要中和表(拟)位基序WxNxxP,DKNR(Q)G和A(T)CxYxKN,分别定位于Erns蛋白的351-356位或348-350位、384-386及322-323位、380-386位氨基酸区域。b4-22针对构象型表位。建立竞争性ELISA抗原检测技术,具有高敏感性。研究工作不仅对探索基因结构与功能的关系、分析蛋白质分子识别机制和研究多肽抗原性分子基础有重要科学意义,而且为开发基因工程疫苗及特异性诊断方法奠定了理论基础。
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