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研究目的:研究布鲁氏菌侵染巨噬细胞后引起自噬对MHCII分子的影响以及可能的影响因素。材料方法:(1)布鲁氏菌16M(16M)分别侵染经IFN-γ处理的正常巨噬细胞和稳定过表达Atg5、Atg7的巨噬细胞后,q RT-PCR检测胞内MHCII m RNA水平、激光共聚焦检测胞内自噬小体和溶酶体的融合率及用流式细胞仪检测细胞表面MHCII分子和OMP31平均荧光强度,研究布鲁氏菌诱导自噬与MHCII的关系。(2)16M侵染巨噬细胞后,ELISA方法检测细胞上清IL-6含量;16M分别侵染经IFN-γ、IL-6及两者共同处理的GFP-LC3标记的巨噬细胞,激光共聚焦观察GFP-LC3的阳性点数;IFN-γ、IL-6及两者共同处理作用于巨噬细胞,q RT-PCR检测自噬相关蛋白Atg5、Atg7的m RNA水平,研究布鲁氏菌诱自噬的可能影响因素。结果:(1)与未经IFN-γ处理组相比,16M侵染IFN-γ处理的巨噬细胞,MHCII分子m RNA水平极显著下降(p<0.01);侵染稳定表达Atg5、Atg7细胞后,细胞内MHCII类分子m RNA水平差异不显著(p>0.05),但自噬小体和溶酶体的融合率升高,细胞表面MHCII分子表达量显著升高(p<0.01)且对OMP31递呈能力显著升高(p<0.01)。(2)16M侵染巨噬细胞,IL-6细胞因子表达量相比对照组显著升高(p<0.01);侵染经IFN-γ处理的GFP-LC3标记的巨噬细胞,激光共聚焦检测GFP-LC3阳性点数最多,但侵染经IFN-γ和IL-6共同处理时,GFP-LC3阳性点数减少;IFN-γ、IL-6作用巨噬细胞,IFN-γ上调了Atg7,但对Atg5没影响,IL-6下调了Atg7和Atg5,IL-6与IFN-γ共同作用时,IL-6抑制IFN-γ诱导的Atg7和Atg5的表达。讨论:一些病毒和细菌在经过自噬-溶酶体途径被呈递到MHCⅡ分子上,自噬对抗原递呈的重要作用表现在增强MHC II分子的负载。自噬参与MHCII类抗原呈递的过程为:自噬体与吞噬体融合传递底物至溶酶体,提供MHCII类分子负载。我们的研究发现布鲁氏菌16M诱导的自噬在阻滞自噬-溶酶体的降解过程中,阻碍了MHC II的递呈过程,为布鲁氏菌感染宿主细胞后产生免疫抑制作用提供有利条件;感染细菌的巨噬细胞分泌的细胞因子IL-6,能够选择性的抑制巨噬细胞对IFN-γ的应。同时研究发现布鲁氏菌16M促进巨噬细胞分泌IL-6抑制IFN-γ诱导的典型自噬,推测布鲁氏菌可能通过IL-6干扰IFN-γ诱导的典型自噬从而诱发非典型自噬。