【摘 要】
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鸽是一种典型的晚成雏鸟类,具有营养价值高、抗病能力强、饲养成本低等特点。目前鸽业养殖在我国已渐成规模,然而对鸽的发育规律和营养物质代谢机制仍有待于进一步研究。本研
【机 构】
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浙江大学饲料研究所动物分子营养学教育部重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金(31072047)
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鸽是一种典型的晚成雏鸟类,具有营养价值高、抗病能力强、饲养成本低等特点。目前鸽业养殖在我国已渐成规模,然而对鸽的发育规律和营养物质代谢机制仍有待于进一步研究。本研究旨在克隆美国王鸽肠道脂肪酸转运载体FAT/CD36和I-FABP基因全长,探明其在美国王鸽从胚胎期至幼年期肠道的表达规律,并通过体外肠道器官培养模型,研究长链脂肪酸对两个基因表达的影响,从而为丰富美国王鸽肠道营养物质吸收机制奠定分子生物学基础。试验首次通过RACE-PCR方法得到美国王鸽长链脂肪酸受体FAT/CD36和肠型脂肪酸结合蛋白I-FABP的全序列,分别为2 282bp和855bp。利用荧光定量PCR技术检测美国王鸽从胚胎期第11天到孵化后第28天FAT/CD36和I-FABP在肠道各部分的mR-NA表达丰度。结果显示:随着发育日龄的变化,FAT/CD36在十二指肠和空肠的基因表达量逐渐升高,并分别于孵化后第14天和第28天达到最大值,而FAT/CD36在回肠的mRNA表达水平未表现出规律性,仅在胚胎期第15天和孵化后第8天表达量显著上升。I-FABP在十二指肠和空肠的表达量呈倍数型增加,分别于孵化当天急剧升高至胚胎期第11天的1 115倍和512倍,并在孵化后第28天达到最大值,而在回肠的表达量于孵化当天达到最大值为胚胎期第11天的229倍,然后逐渐退化降低至胚胎水平。由此说明,I-FABP可以作为美国王鸽肠道各部分发育的指标蛋白之一,与哺乳动物不同的是,美国王鸽肠道吸收长链脂肪酸的主要部位集中在十二指肠和空肠,而回肠可能仅在孵化前期起到辅助吸收的功能,而在发育后期却逐渐退化,这可能是飞行类鸟类长期进化适应的结果。利用体外器官培养模型检测不同碳链长度和饱和度的长链脂肪酸对美国王鸽空肠FAT/CD36和I-FABP表达量的影响。结果表明:油酸、亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸能够显著提高美国王鸽空肠的FAT/CD36的基因表达量,而高浓度(250μ.mol/L)的棕榈酸则抑制其表达量。与此同时,过氧化物酶增殖体PPARγ的基因表达量也表现出一定的协同性,另外,亚油酸和花生四烯酸能够显著提高美国王鸽空肠的I-FABP的基因表达量,而油酸和亚麻酸对其表达量无显著影响。结果提示美国王鸽肠道FAT/CD36可能通过PPARγ途径受不饱和脂肪酸正向调节,而I-FABP的基因表达量则仅受n-6多不饱和脂肪酸调节。
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