乙型肝炎病毒DNA转染与鸭乙型肝炎病毒感染原代鸭肝细胞对比研究

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<正>目的:通过对比观察,探讨HBV DNA复制和表达的跨种属特异性,为HBV DNA转染跨种属原代肝细胞模型的建立提供实践基础和理论依据.方法:分离培养原代鸭肝细胞(PDH),电转线性HBV DNA(转染组,1.19×1012拷贝/1×107 PDH)或急性感染DHBV(感染组,4×108病毒颗粒/1×107 PDH),分别于转染/感染后1d、3d、5d等时点检测PDH培养上清或裂解液中HBsAg、HBeAg与DHBsAgd(采用IMX系统或ELISA检测);并采用Dot Blotting检测PDH裂解液中总HBV DNA.于转染/感染后2d提取PDH总DNA采用Southern Blotting分析HBV DNA与DHBV复制型式.以单纯电击/未感染的PDH为对照
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