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【目的】达氟沙星(danofloxacin)是动物专用的第二代喹诺酮类药物,该类药物80%以原形从尿中排泄,尿药浓度高于血药浓度10倍左右,可对肾脏可造成不同程度的损害,但是其损伤机制还不是很清楚。本试验通过研究达氟沙星诱导体外培养的猪近端肾小管上皮细胞(LLC-PK1)产生氧化应激的作用,初步探究达氟沙星造成肾损伤的机制。【方法】以不同浓度的达氟沙星孵育LLC-PK1细胞不同时间后,在倒置显微镜观察细胞形态上的变化,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测达氟沙星对细胞增殖的影响,流式细胞术检测凋亡率,初步研究达氟沙星对LLC-PK1细胞的毒作用。然后通过检测细胞内活性氧ROS、脂质过氧化物MDA,氧化还原酶SOD影响来探究达氟沙星对LLC-PK1细胞氧化还原系统的影响。【结果】结果表明,达氟沙星呈时间和剂量依赖性诱发体外培养的LLC-PK1细胞增值抑制,但是只有400μM孵育48h才对细胞产生较大程度的凋亡,凋亡率为22.7%,其余的都在5%以下。另外,达氟沙星能浓度依赖性诱导细胞内ROS及MDA的产生,在所检测的时间点(6h、12h、24h、48h、72h)内,24h细胞内ROS达到最大值,继续延长孵育时间ROS逐渐减少,并且抗氧化剂GSH、NAC能极显著降低ROS的产生。MDA虽有增加的趋势,但是增加的值比较低,最大为2.72nmol/mg蛋白。说明达氟沙星对LLC-PK1细胞的氧化损伤比较轻微,并且达氟沙星能一定程度诱导SOD活性增加来清除细胞内过多的氧自由基。【结论】达氟沙星能一定程度低诱导体外培养的LLC-PK1细胞产生氧化应激,但是同时也能激发细胞内抗氧化活性降低氧化损伤。