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目的探讨Notch在三邻甲苯基磷酸酯(Tri-ortho-cresyl phosphate,TOCP)诱发SH-SY5Y细胞神经毒性中的关系,进一步阐述TOCP神经毒性的作用机制。方法采用Notch信号通路阻断剂DAPT预处理SH-SY5Y细胞30min,再用TOCP(0、0.25、0.50、1.0 mM)毒处理48h,用MTT法检测细胞的存活率,Westem Blot检测细胞Notch信号通路相关蛋白NIC1和Hes1、自噬相关蛋白Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ水平;用自噬泡特异性染色剂MDC进行细胞染色,观察各组自噬泡的变化。同时以DAPT预处理未分化和已分化(全反式维甲酸诱导分化)的SH-SY5Y细胞30min后,用0.50mM TOCP染毒24h,Western Blot检测NF-H,tau,p-tau蛋白表达量。结果与对照组相比,随着TOCP浓度增加,TOCP染毒组和DAPT预处理后染毒TOCP组,细胞存活率都随之下降,但采用DAPT预处理阻断Notch后再进行TOCP染毒较单独TOCP染毒组的细胞存活率有所改善(P<0.05)。TOCP染毒组和DAPT预处理后染毒TOCP组抑制SH-SY5Y细胞Notch信号通路相关蛋白NIC1和Hesi蛋白表达(P<0.05),而DAPT预处理组的NIC1和Hes1蛋白表达更低(P<0.05)。DAPT预处理SH-SY5Y后TOCP染毒组以及0.50 mM TOCP染毒组与对照组比较,DAPT预处理组Beclin1和LC3表达受抑制(P<0.05)。MDC染色结果显示,DAPT预处理+0.50 mM TOCP染毒组产生的自噬泡数量比单独TOCP染毒组减少。与对照组比较,DAPT预处理未分化和已分化SH-SY5Y细胞后再进行TOCP染毒,比单独0.50mM TOCP染毒,NF-H蛋白表达水平上升(P<0.05),但DAPT预处理组tau蛋白水平下降(P<0.05),而p-tau在0.50mM TOCP染毒组表达量最低(P<0.05)。结论 TOCP可抑制Notch信号通路NIC1和Hes1蛋白表达;DAPT阻断Notch信号通路后,可以一定程度上抑制TOCP诱导的细胞自噬及其所致的NF-H蛋白减少。