现代实时细胞分析技术在食品有效成分抗癌活性中的应用研究

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【目的】应用实时无标记细胞分析技术(RealTime Cellular Analysis,RTCA)研究山西老陈醋提取物对癌症细胞体外增殖的抑制作用。【材料和方法】以"东湖"牌山西老陈醋为材料,采用高效液相色谱、顶空固相微萃取-气质联用和氨基酸分析仪等现代分析技术,对其原辅料(高粱、大曲、麸皮和谷壳)的主要成分进行了测定,并对其发酵和陈酿过程中主要成分的变化进行监测。后通过乙酸乙酯萃取、制备色谱分离从5年山西老陈醋的乙醇提取物中分离到7种不同极性的粗提物(V1-V7,极性从大到小),并通过实时无标记细胞分析技术(RTCA S16 Cell Analyzer,ACEA Biosciences Inc,USA)研究了这7种粗提物对5种癌症细胞(人肺癌细胞A549、人肝癌细胞Hep-G2、人乳腺癌细胞MDA-MDB-231、人子宫颈癌细胞Hela和人结肠癌细胞HCT116)和一种正常细胞(人脐静脉内皮细胞HUVEC)体外增殖或抑制作用。【结果】山西老陈醋中的糖类主要来源于高粱(36.1%)、大曲(29.4%)和麸皮(23.7%),蛋白质主要来源于大曲(40.6%)和麸皮(38.0%),多酚和黄酮则主要来源于高粱(65.4%和96.4%)。山西老陈醋中的有机酸、氨基酸和挥发性风味化合物主要在发酵过程中产生,陈酿过程中,其主要成分的含量皆随陈酿时间的延长而升高。通过RTCA技术完成的抗癌实验结果显示,除V2和V3外其余5种粗提物对试验细胞均无显著性抑制作用,其中V2的抑制效果最强,A549(61.5%),Hep-G2(49.1%),MDA-MDB-231(44.4%),HUVEC(33.5%),Hela(11.5%),HCT116(无显著性抑制)。且V2对A549体外增殖的IC50为18.3μg/mL(R~2=0.9888)远低于其对正常细胞HUVEC的IC50值281μg/mL(R~2=0.9820)。【结论】山西老陈醋是一种富含有机酸,氨基酸,酚类化合物及各种香气成分的酸性调味品,其乙醇提取物的V2组分对人肺癌细胞A549体外增殖具有较好的抑制作用。实时无标记细胞分析技术为食品有效成分抗癌活性研究提供了一个不可替代的新一代分析工具。
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