家蚕与丝腺程序性细胞死亡相关的Foxo基因功能鉴定

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FOXO是胰岛素样生长因子IGF/PI3K/FOXO信号转导通路的重要组成,在动物的生长发育、细胞分化、代谢凋亡、信号转导等方面有多种重要的生物功能。在哺乳动物中,FOXO与细胞分裂周期、死亡、应激、解毒等不同的细胞进程有关。家蚕幼虫至蛹变态期间发生着激烈的新旧组织更迭,其中包括幼虫专性组织丝腺等迅速退化消亡。家蚕FOXO是否可能涉及家蚕特定组织状态的细胞分化与凋亡调控,目前尚未有相关研究。为此,本文以家蚕幼虫到蛹变态期自发的和诱导的程序性细胞死亡(PCD)为切入点,克隆了家蚕Foxo全长基因,调查了Foxo基因的表达谱,并通过蜕皮激素及限食与饥饿处理诱导细胞PCD发生,调查了个体丝腺组织和BmN细胞中Foxo基因及其上下游信号转导途径相关基因表达变化情况,以及某些情况下丝腺中FOXO蛋白表达变化情况。在个体水平上,无论正常发育还是蜕皮激素处理后,Atg8基因的表达量上调时期均在Saposin-like之前,暗示自噬发生于细胞凋亡之前,这与已有的形态学研究结论一致;在细胞水平上,在蜕皮激素或饥饿处理后,对BmN细胞染色观察发现自噬现象均优先于凋亡发生,同时在饥饿处理后,ATG8基因的表达量上调优先于Saposin-like。根据相关研究结果推测,家蚕细胞自噬也可能发挥了抑制细胞凋亡或坏死,保护细胞的作用,这为家蚕细胞自噬与凋亡之间可能存在的联系提供了新的依据。
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