引言 利用真核表达载体与哺乳动物细胞系表达鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)结构蛋白VP2,形成病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs),探究其在鹅外周血淋巴细胞(Peripheeral blood lymphocyte,PBLs)中引起的细胞免疫应答.材料与方法 GPV由四川农业大学预防兽医研究所提供；GPV多抗血清由本研究中心制备；鼠源His标签抗体购自美国Protein公司,HRP标记羊抗鼠IgG购自美国EARTH公司；鹅外周血淋巴细胞分离液购自中国天津灏洋有限公司.采用一步法克隆构建表达质粒pcDNA3.1-VP2并转染293T细胞,将细胞裂解物经SDS-PAGE、western blot和间接免疫荧光染色法验证pcDNA3.1-VP2在HEK293T细胞中的成功表达.将收集的细胞裂解产物经超速离心纯化,以PBS重悬并定量,以VP2-VLPs处理鹅PBLs细胞,6h后检测CD4、CD8α、IL-6、IL-1β、IFN-α、IFNγ及IFNλ的表达量,同时以PBS组作对照.结果与讨论 成功构建出真核表达质粒pcDNA3.1-VP2,在HEK293T细胞中表达的蛋白分子量大小约为70kDa.刺激鹅外周血淋巴细胞后,与对照组相比,CD4和CD8α基因的表达量无明显变化,IL-1β和IFN-α显著升高,且IL-6、IFN-γ、IFNλ基因表达量均上调.GPV的衣壳蛋白VP2刺激鹅外周血淋巴细胞能诱导细胞免疫增强,该结果为GPV-VP2病毒样颗粒疫苗的研制提供了一定的理论依据.