【摘 要】
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目的研究SD 胎鼠皮肤成纤维细胞中,纤维调节素的作用机制。方法培养SD 胎鼠无瘢痕愈合期(E16天)和瘢痕愈合期(E18天)的皮肤成纤维细胞,将构建的纤维调节素SiRNA 载体转染成纤
【机 构】
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四川大学华西口腔医学院唇腭裂研究室;
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目的研究SD 胎鼠皮肤成纤维细胞中,纤维调节素的作用机制。方法培养SD 胎鼠无瘢痕愈合期(E16天)和瘢痕愈合期(E18天)的皮肤成纤维细胞,将构建的纤维调节素SiRNA 载体转染成纤维细胞,对纤维调节素进行高效、长期的RNA 干扰,在转染后1、2、3、5、7、10、14天回收细胞,提取细胞总RNA,使用荧光定量PCR 技术,检测样品中TGF-β1、TGF-β3、CTGF、纤维调节素的mRNA 表达量。结果两种成纤维细胞中的纤维调节素被高效、长期的RNA 干扰后,TGF-β1 mRNA 的表达有升高的趋势:在E16天的成纤维细胞,TGF-β1表达在转染24小时后,升高2.1倍(p<0.05),并维持高表达,在14天时,是对照组的2.0倍(p<0.05);TGF-β3的表达有降低的趋势:在E16天的细胞中转染48小时后,TGF-B 3的mRNA 的表达是对照组的30%(p<0.05),转染72小时后,是对照组的33%(p<0.05),此后一直维持低表达;CTGF mRNA 的表达有升高的趋势:在转染的7天后,在E16天细胞中CTGF 的mRNA 的表达是对照纽的134%(p<0.05)转染10天后,是对照组的155%(p<0.05),转染14天时是对照组的2.2倍(p<0.05)。结论纤维调节素可能通过上调TGF-β3,降低TGF-β1、CTGF mRNA 的表达,在胎鼠皮肤无瘢痕愈合中起重要作用。
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