香加皮提取物杠柳苷抗淋巴瘤机制的研究

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目的 :研究中药香加皮化学成分杠柳苷(CPP)对淋巴瘤细胞系Jurkat和HuT 78细胞生长的影响,并探讨其影响细胞周期的机制,为其作为抗癌新药开发提供理论依据。方法 :采用MTS方法检测不同浓度的杠柳苷在体外对淋巴瘤细胞增殖的影响。采用流式细胞术检测不同浓度的杠柳苷对Jurkat和HuT 78细胞凋亡和细胞周期的影响。使用蛋白印迹法(Western-blot)检测不同浓度的杠柳苷对Jurkat和HuT 78细胞CDK1和Cyclin B1蛋白表达的影响。结果:以不同浓度的CPP处理Jurkat和HuT 78细胞24小时和48小时,MTS结果显示,100ng/ml,200ng/ml和400ng/ml浓度的CPP处理Jurkat细胞24小时,与对照组相比,增值率分别为64.08%,56.86%和52.48%,P <0.05,差异有统计学意义。处理Jurkat细胞48小时,增值率分别为67.89%,50.11%和43.67%,P <0.05,差异有统计学意义。以相同浓度的CPP处理HuT78细胞24小时,增值率分别为93.98%,85.11%和62.24%, P <0.05,差异有统计学意义。处理HuT 78细胞48小时,增值率分别为80.40%,70.37%和63.85%, P <0.05,差异有统计学意义。流式细胞术结果显示,100ng/ml,200ng/ml和400ng/ml浓度的CPP处理Jurkat细胞24小时,细胞的凋亡率分别为7.59%,11.21%和11.28%,细胞周期阻滞在G2/M期的比例分别为14.44%,22.23%和23.54%,P <0.05,差异有统计学意义。以相同浓度的CPP处理HuT 78细胞24小时,细胞的凋亡率分别为19.09%,31.13%和44.45%,细胞周期阻滞在G2/M期的比例分别为23.25%,28.60%和41.15%,P <0.05,差异有统计学意义。Western blot结果显示,100ng/ml,200ng/ml和400ng/ml浓度的CPP处理Jurkat或HuT 78细胞24小时,CDK1和Cyclin D1蛋白质的表达呈浓度依赖性降低。结论 :中药香加皮化学成分杠柳苷(CPP)可以抑制淋巴瘤细胞系Jurkat和HuT 78细胞在体外的增殖,促进其凋亡,并通过降低CDK1和Cyclin B1蛋白质的表达从而将细胞周期阻滞在G2/M期。
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