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<正>目的构建结核分枝杆菌复活促进因子D(RpfD)的原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达和纯化.方法采用聚合酶链反应(PCR)方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中扩增出 RpfD基因(465bp),然后用双内切酶消化后,与同样酶消化的pET32a(+)载体连接,转入大肠杆菌Top10;阳性克隆用酶切和DNA测序鉴定。测序正确后,将重组质粒转化到的大肠杆