MUC1/Y粘蛋白结合肽的筛选研究

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MUC1/Y 是一种Ⅰ型膜蛋白,是 MUC1粘蛋白的一种同种型(isoform)。初步研究表明,其表达具有肿瘤特异性,即在乳腺和卵巢癌细胞表面高度表达,而在正常乳腺和卵巢中不表达;血循环中无 MUC1/Y 蛋白;作为一种膜受体,容易被内化。因此,MUC1/Y 是一种潜在的、理想的肿瘤生物治疗的靶分子。本文利用原核系统表达获得的 MUC1/Y 胞外段蛋白,用两种方法(凝胶亲和法和酶联板法) 来筛选噬菌体随机12肽库;各通过4轮生物淘洗(biopanning)后,随机挑取60个噬菌体克隆进行 ELISA 分析,选出16个克隆进行 asDNA 序列测定,获得的 MUC1/Y 结合肽共有3种序列,同源分析表明 HXXHS(K)可能是结合肽的主要结合表位。细胞免疫组化分析表明, 筛选获得的噬菌体克隆可与 MCF7(MUC1/Y+/MUC1+)和 OVCA3 (MUC1/Y+/MUC1+)结合,而与健康献血者外周血淋巴细胞(PBL) (MUC1/Y-/MUC1+)不结合。组织免疫组化结果显示,噬菌体克隆与乳腺癌组织结合而与结肠癌组织不结合。上述结果初步表明,筛选获得的噬菌体克隆具有一定的亲和力,可与一些特定肿瘤组织和细胞结合,而与正常 PBL 不结合,表现出一定的肿瘤特异性。筛选获得的结合肽为进一步用于肿瘤导向治疗和 MUC1/Y 的生物学功能的研究奠定了基础。
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