一种病原性真菌通用PCR检测方法的建立

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目的:建立一种真菌通用PCR扩增技术方法,用于临床真菌感染的快速检测与鉴定。方法:以真菌5.8S rRNA基因和28S rRNA基因的保守序列,设计真菌通用引物,建立真菌rRNA基因通用PCR扩增方法并进行优化。并用该通用PCR方法检测临床常见的20种病原性真菌。结果:该通用PCR方法对20种靶真菌均可扩增出目的DNA带,产物大小在259~531 bp之间,所有非真菌样品扩增结果均为阴性。该PCR扩增方法的灵敏度可达10pg/ml热带念珠菌DNA。结论:本研究中建立的通用PCR扩增方法具有很好的特异性、敏感性和稳定性,可直接用于病原性真菌的检测,并且扩增产物非常适合用于真菌进行型别的鉴定。
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