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目的:Gsk-3β(Glycogen synthase kinase-3β)/β-catenin信号通路在腭发育过程中发挥着重要的调控作用。LiCI(lithium chloride)能够抑制Gsk-3β的表达从而激活wnt/β-catenin信号通路,其对骨形成也具有调控作用。本实验主要探讨LiCI对体外培养腭板的融合及成骨分化的影响。方法:选取CD1孕鼠胚胎第13天(E13)腭板进行体外培养,将其分成LiCI干预组(10mM)和对照组(PBS),72小时后收集组织。将组织常规固定包埋后切片,分别进行H E染色和免疫组化,观察腭板融合情况及组织中成骨标志物(碱性磷酸酶、骨钙素)表达的变化,用Ki-67免疫组化和TUNEL染色等方法检测腭板中细胞增殖和凋亡情况。提取组织RNA后用定量PCR检测成骨标志物(碱性磷酸酶、骨钙素、Runx2)及Gsk-3β在mRNA水平表达的变化,提取组织蛋白后用Western blotting分析Gsk-3β及β-catenin在蛋白水平表达的变化。结果:将10mM LiCI作用于体外培养的腭板72小时后,腭中线上皮缝没有完全消失,腭板不能正常融合;成骨标志物在mRNA和蛋白水平的表达均较正常组明显降低(P<0.05);腭板类骨质区域Ki67阳性细胞数目显著性增加(P<0.05),而两组在间充质区域Ki67阳性细胞数目并没有显著性差异;腭中线上皮缝处凋亡细胞明显减少(P<0.01);Gsk-3β在mRNA和蛋白水平的表达均下降(P<0.05);而β-catenin蛋白表达反而增加(P<0.01)。结论:LiCI通过抑制GSK3β的表达来激活β-catenin信号通路,从而抑制腭板融合及成骨分化。这也表明激活经典的Wnt信号通路可能导致腭板不能正常融合。