人牙髓干细胞来源的外泌体在体外促进人牙髓干细胞分化及矿化

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目的:外泌体(Exosomes,Exos)是一种包含了复杂RNA和蛋白质的由细胞分泌的直径为50-150nm的盘状囊泡。由于外泌体可调节受体细胞相关生物活动,并且没有天然或组织工程干细胞移植的免疫排异反应,因而在组织再生领域逐渐受到重视。本研究旨在探讨人牙髓干细胞(human Dental pulp stem cells,hDPSCs)外泌体在体外促进hDSPCs分化及矿化的作用。方法:hDPSCS在促矿化培养基(odontogenic media,OM)中培养14天后,从上清液中分离出外泌体,命名为OM-hDPSCExos。通过直径表征和特异性表面标记物证明提取的为外泌体。利用hDPSCs研究外泌体对其迁移、分化和矿化的影响。结果:茜素红染色显示,OM+OM-hDPSC-Exos处理后14天,基质矿化程度明显高于单纯OM处理。实时聚合酶链反应结果显示,在OM中添加OM-hDPSC-Exos 14天后,牙本质唾液磷蛋白(DSPP)和runt相关转录因子2 (RUNX2)表达上调。Transwell迁移实验表明,OM-hDPSCExos引起细胞迁移的多少与外泌体浓度成正比。结论:OM-hDPSC-Exos与OM协同诱导hDPSCs向成牙细胞分化,并在体外诱导矿化。来自hDPSCs的外泌体可能是一种很有前途的促进牙本质再生的工具。
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