超低温冷冻保存对七带石斑鱼胚胎成活率的影响

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本文利用6种小分子抗冻剂和4种大分子抗冻剂,通过单一、两种和三种抗冻剂组合使用,以及大分子与小分子抗冻剂混合使用,检测不同组合抗冻剂对七带石斑鱼胚胎孵化率的影响,从而筛选出适宜胚胎冷冻保存的玻璃液。结果表明;PM(24%PG+16%Me OH):Gly=3:1或4:1组成的玻璃化液中胚胎的孵化率较高。进一步实验显示PMG3S(35%PMG3+5%蔗糖)和PMG3T(35%PMG3+5%海藻糖)中胚胎成活率分别达可29.24±10.81%和27.01±3.39%。当利用PMG3S和PMG3T采用五步法分别处理肌节期和尾芽期胚胎时,当处理6min时胚胎体积脱水变小,之后逐渐恢复到正常体积,说明玻璃化液渗透进行胚胎细胞。利用PMG3S和PMG3T两种玻璃化液分别冷冻保存胚体形成期、肌节期和尾芽期胚胎,获得了82粒上浮胚胎,其中14粒胚胎继续发育,8粒尾芽期胚胎发育到心跳期,4粒胚体形成期胚胎发育到肌节期,2粒肌节期胚胎孵化出膜。
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