喹乙醇诱导的细胞凋亡及S期阻滞涉及JNK/GADD45a信号通路

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【目的】兽用饲料添加剂喹乙醇具有明显的遗传毒性,但其分子机制尚不清楚,本文旨在探讨喹乙醇遗传毒性分子机制及其JNK/GADD45a信号通路的作用。【方法】不同剂量(0、200、400、800μg/mL)喹乙醇作用于人HepG2细胞24 h后,检测MAPK家族蛋白(p-JNK、p-P38)、DNA损伤相关蛋白(GADD45a、p53及p21)、细胞周期相关蛋白(cyclinB、cyclinA、cyclinD1、cyclinE)及线粒体信号通路相关蛋白(bcl-2、bax、CytC及caspase3)蛋白表达情况;并进一步使用JNK抑制剂及GADD45a干扰,探究JNK/GADD45a在喹乙醇致诱发HepG2细胞凋亡的影响。【结果】与对照组相比,喹乙醇可致p-JNK、p-P38、GADD45a、p53、cyclinB、cyclinA、cyclinE蛋白表达显著增加(均p<0.05或0.01),并伴随明显的剂量依赖性变化,并可导致明显的S期阻滞;进一步研究发现,JNK抑制剂(SP600125)可明显抑制GADD45a蛋白表达及喹乙醇诱导的HepG2细胞凋亡,且GADD45a干扰后可明显增加喹乙醇诱导的细胞凋亡(p<0.05),增加S期细胞阻滞(均p<0.05)。【结论】JNK/GADD45a信号通路的激活参与喹乙醇诱导的DNA损伤及S期阻滞。
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