MED烟粉虱唾液腺转录组分析与唾液蛋白的质谱鉴定

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烟粉虱Bemisia toabaci属半翅目Hemiptera,粉虱科A1eyrodidae,是一类典型的刺吸式口器小型昆虫。烟粉虱分布范围广,寄主广泛,对作物可产生多种危害,并可传播多种植物病毒,是一类重要的农业害虫。在烟粉虱取食与危害植物的过程中,其唾液起到关键作用。烟粉虱的唾液可分为胶状唾液与水状唾液,其中水状唾液中可能含有十分复杂蛋白成分,可与植物体内产生的物质相互作用,来抵御植物的防御反应,保证烟粉虱的成功取食。因此研究烟粉虱水状唾液成份有利于揭示烟粉虱参与植物互作的蛋白,阐明昆虫在取食和传播病毒过程中与植物的互作机制。本研究结合转录组学和蛋白组学对烟粉虱的唾液蛋白进行鉴定。首先测定了烟粉虱唾液腺主腺和附腺的转录组,在附腺转录组中共得到平均长度481bp的unigenes 73459条,主腺转录组获得了平均长度665bp的unigenes 59736条。对转录组数据进行分析后发现,烟粉虱的主腺与附腺都具有旺盛的代谢和蛋白质合成活性。对唾液腺转录组进行分泌蛋白预测时,在主腺和附腺中分别预测到705和1005个分泌蛋白,其中消化酶类,防御相关蛋白,解毒酶,杀虫剂抗性蛋白以及效应因子这五大类蛋白在主腺和附腺中都有发现。功能分析表明唾液腺主腺和附腺都参与唾液蛋白的合成与分泌,并且主腺与附腺所行使的功能很可能具有相似性。在蛋白组学分析中,我们利用人工饲料收集大量的烟粉虱唾液,通过高精度Q-Exactive质谱直接进行shotgun蛋白鉴定。我们共鉴定到共得到223条肽段,根据FDR≤0.01进一步筛选得到155个可信蛋白。其中包括多次鉴定到并在唾液腺转录组中预测为分泌蛋白的细胞色素P450,同样在褐飞虱唾液质谱中出现的延伸因子,热激蛋白,肌动蛋白,GAPDH等持家基因,还有一些氧化还原酶与未知基因。这些蛋白的发现使得我们距揭示烟粉虱唾液的组成又近了一步,为我们今后发现更多唾液防御相关蛋白与效应因子提供了分子基础,同时也为烟粉虱的防治提供了潜在的靶标基因。
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