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乳腺癌(Breast Cancer)是一种女性恶性肿瘤,对患者身心产生巨大伤害。目前对于造成乳腺癌患者死亡的具体原因机制并不清楚。在肿瘤等多种疾病中,微小RNA(microNRA,miRNA)具有重要的功能,miRNA既可作为抑癌基因也可作为致癌基因,从而在肿瘤发生发展的全过程中发挥不同的作用,同时miRNA自身也可以发生突变或缺失等现象,进而影响相关基因的表达发生异常。对miRNA进行分析,可发现多种miRNA与生命活动关键蛋白和信号通路的调节有关,通过对这些蛋白和通路进行研究,可了解miRNA发挥的作用的具体机制。而乳腺癌的发生发展与转移等过程是由许多miRNA信号分子调控的,通过上述通路调节的研究,我们可以得出miRNA在乳腺癌中的的作用,从而为乳腺癌的前期诊断和后期治疗提供一些新的思路和方法。miR-29b作为miRNA中的成员之一,参与了多种肿瘤细胞的增殖、分化、凋亡、侵袭和转移过程。miR-29b已成为与肿瘤诊断、治疗和预后相关的具有潜在价值的肿瘤标志物。然而,miR-29b在乳腺癌中的作用目前尚未明确,因此,研究miR-29b在乳腺癌发生发展过程中的作用及其作用靶点的探讨十分具有意义。目的:探讨微小RNA-29b(miRNA-29b)在乳腺癌组织和细胞中的表达水平,分析miRNA-29b的表达与乳腺癌患者临床病理参数及预后的相关性,观察miRNA-29b对乳腺癌细胞周期、增殖、凋亡和迁移的影响,生物信息学预测miRNA-29b的靶基因,并初步探讨其可能的作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR的方法检测miR-29b在乳腺癌细胞株和乳腺癌患者癌组织中的表达,采用总RNA提取试剂盒提取新鲜冰冻组织及细胞株中总RNA,使用PrimeScript RT试剂盒反转录法合成cDNA,ABI 7500荧光定量PCR仪进行PCR反应;采用统计分析法对乳腺癌癌组织中mi R-29b水平与患者临床病理参数进行相关性分析。CCK8法和细胞划痕实验分别检测过表达mi R-29b后乳腺癌细胞增殖和迁移,流式细胞术检测乳腺癌细胞的细胞周期和凋亡情况。通过TargetScan和miRanda等靶基因预测数据库对miR-29b的靶基因进行预测,分析miR-29b过表达与HER-2表达的相关性,研究miR-29b过表达对HER-2蛋白的影响,Western blotting检测过表达miR-29b的乳腺癌细胞中HER-2的表达,初步验证miR-29b的作用靶点。结果:miR-29b在乳腺癌组织和乳腺癌细胞中的表达显著下调;miR-29b过表达能够抑制乳腺癌细胞的增殖,促进起凋亡,并减弱其迁移和侵袭能力(P<0.01);miR-29b与HER-2存在直接靶向负作用关系,乳腺癌患者癌组织中mi R-29b的表达水平与患者年龄和浸润程度之间无显著相关性(P>0.05),而与患者乳腺癌组的肿瘤大小和HER-2及淋巴结转移有显著相关性(P<0.01),乳腺癌患者的预后与乳腺癌组织中miR-29b的表达有很明显的关系:miR-29b表达越低,患者预后越差(P<0.01)