近年来,我国不断有新亚型禽流感病毒感染人的报道,如H5N1、H9N2、H7N9、H6N1、H10N8和H5N6,及最近报道的H7N4病例,严重威胁着公共健康安全。我国的家禽销售模式和饲养数量,给新流感病毒产生提供了条件。基于禽职业暴露人群,针对感染人的不同亚型禽流感病毒血清学研究,及对新流行的禽流感病毒进行分子生物学特性和进化分析,评估禽流感病毒跨种间传播的能力,预测禽流感病毒在人与人之间传播的风险,对于公共卫生安全具有重要意义。本研究中于2014-2016年在我国的广东省、江西省、江苏省、四川省、河南省、山东省和上海市,这7个地区进行活禽市场病原学和血清学监测,在流感流行季节前(11月)和流感流行季节后(4月)对禽职业暴露人群进行血样采集,并对调查者进行问卷调查,收集相关信息。对采集的血清样本利用血凝抑制试验和病毒微量中和试验的方法,用H5N1、H5N6、H6N1、H6N6、H7N9、H9N2和H10N8亚型病毒作为抗原,进行禽流感病毒抗体的检测。对单次收集的样本进行横断面研究分析,而对于同一个人连续多次收集的样本进行队列研究分析,对阳性个体进行时空分布分析,结合Logistic回归分析方法,找到禽职业暴露人群抗体阳性相关危险因素。此外,对2016-2017年第五波H7N9流行季收集到的35株病毒进行测序,结合数据库中的205条第五波H7N9全基因组序列,进行地理时空和分子进化分析。从2014.12至2016.4,4次共招募到1406名禽职业暴露个体,其中有755名采集的单次样本,用于横断面研究分析,而对于651名采集两次及以上的对象进行队列研究。横断面研究显示,血清阳性率最高的是H9N2(10.9%),其次是H7N9(3.3%),而 H5N1(0.5%H5N1-SH199 和 1.9%H5N1-SC29)、H5N6(2.0%)、H6N1(1.7%)和H6N6(0.4%)有较低的阳性率,然而在调查的人群中没有发现H10N8的血清阳性个体。队列研究发现,2年内血清阳转率最高的仍是H9N2(8.4%),其次是 H7N9(2.2%),然而 H5N1(0.6%H5N1-SH199 和 2%H5N1-SC29)、H5N6(1.4%),H6N1(0.9%)有较低的血清阳性率。通过对空间地理位置进行分析,山东省是H9N2(21.9%)血清阳性率最高的省份,而江苏省(8.4%)和上海市(8.3%)是H7N9阳性率最高的省份;血清阳转率中山东省(27.3%)和上海市(25.0%)具有很高的阳转率,其次是江苏省(20.8%)和广东省(19.6%)。危险因素分析显示:工作者年龄、暴露于鸭、接触病死禽类及H1N1抗体阳性是与H5亚型抗体阳性相关的危险因素;女性、销售职业、H3N2抗体阳性与H7N9亚型抗体相关;女性、销售职业、工作年限与H9N2抗体相关;值得注意的是活禽市场暴露人群病毒分离率与暴露人群中H7N9和H9N2抗体成正相关。对2016-2017年第五波H7N9流行季H7N9分析发现,该病毒已经基本传播大部分省份,出现了高致病性 H7N9 病毒(Highly pathogenic avian influenza virus,HPAIV),并且不断与不同亚型和株系的病毒(H7N9/H9N2和H6Ny)进行重配。本研究对第五个流行季240株病毒基因进行分析,发现它们共分成36个基因型,HPAIV有15种基因型,G3基因型占到了 46%(28/61)。其中有3个主要流行的基因型(G1/G3/G11)。关键发现HP毒株的剪切位点存在4种形式,分别是PKGKRTAR/G、PKGKRIAR/G、PKRKRAAR/G 和 PKRKRTAR/G。功能性位点分析发现,神经氨酸酶耐药株(R292K)不仅在人源的病毒中分离到,也在禽源的病毒中分离到;哺乳动物适应性位点(PB2 E627K和D701N)也在禽源病毒中被发现。综上所述,禽职业人群中有一定禽流感病毒的血清阳性率,提示可能存在隐性感染情况。通过对H7N9病毒的基因分析发现,病毒通过重配和点突变的方式不断产生哺乳动物适应性和耐药性病毒株,这都提示存在禽流感病毒传给人的风险。因此我们对禽流感病毒仍需要密切监测,有效的防控禽流感病毒,降低其对公众健康的危害。