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目的:本课题主要研究2-氨基乙氧基二苯基硼酸盐(2-aminoethoxydiphenyl borate,2-APB)对缺血性脑中风诱导的原代神经元损伤的影响,并探讨其可能的作用机制,为脑缺血临床药物治疗提供新的策略。方法:(1)培养原代大鼠皮层神经元细胞,利用原代大鼠皮层神经元探究2-APB对原代神经元损伤的影响。(2)建立原代大鼠皮层神经元糖氧剥夺/再复氧(Oxygen-Glucose Deprivation/Reoxygenation,OGD/R)损伤模型,利用该损伤模型探讨2-APB对神经元的保护作用,利用Annexin-V/PI染色以及Hoechst染色方法观察2-APB对OGD/R损伤的原代大鼠皮层神经元的凋亡影响。(3)利用流式细胞仪检测2-APB对OGD/R损伤诱导原代大鼠皮层神经元细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)积累的影响。(4)Western blotting法检测2-APB对OGD/R诱导的神经元损伤模型中ROS相关蛋白NOX2、Rac1、p40phox、p47phox和p67phox以及Wnt/Ca2+信号转导通路相关蛋白Wnt5a、Frizzled、和Dishvelled的影响。结果:(1)2-APB能够增加OGD/R处理后原代大鼠皮层神经元存活率,且保护作用与依达拉奉(Edaravone,Eda)相当,优于丁苯酞(n-Butylphthalide,NBP);此外,2-APB能够减轻细胞核固缩和浓染,抑制OGD/R诱导的神经元细胞的凋亡。(2)2-APB处理能够减少OGD/R神经元损伤释放的ROS含量,发挥抗氧化的作用。(3)Western blotting结果显示,2-APB可以显著性抑制OGD/R诱导的NOX2、Rac1和p40phox蛋白的表达,但对p47phox和p67phox蛋白的表达无明显作用。(4)Western blotting结果显示,2-APB可以显著性抑制OGD/R诱导的Wnt/Ca2+信号转导通路相关蛋白Wnt5a、Frizzled、和Dishvelled的激活。结论:2-APB对OGD/R诱导的原代神经元细胞损伤具有保护作用;2-APB抑制缺血性脑中风诱导的神经元凋亡,这可能与其抗氧化的作用和其抑制Wnt/Ca2+信号转导通路有关。