低分子肝素对孕早期基质细胞蜕膜化的作用研究

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目的:分析低分子肝素(low molecular weight heparin,LMWH)对孕早期基质细胞蜕膜化的作用,探究LMWH对妊娠结局的影响。方法:细胞实验部分:临床收集2018年3月-6月在云南省第一人民医院生殖医学科及妇科就诊的复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)患者及要求人工流产的正常早期妊娠女性的子宫蜕膜组织各10例,分别为RSA组和对照组,分离纯化后行原代蜕膜基质细胞培养,比较两组细胞增殖情况;LMWH处理对照组蜕膜化基质细胞,增殖实验及划痕实验检测基质细胞蜕膜化情况,Western Blot检测相关蛋白表达并进行分析。动物实验部分:采用DBA/2×CBA/J的Clark经典反复流产模型小鼠20只,按妊娠随机分为RSA模型组、LMWH实验组,每组10只,及BALB/c×CBA/J正常妊娠小鼠10只作为对照组,从妊娠第一天始记D0,给予LMWH组皮下注射低分子肝素,RSA组及对照组皮下注射生理盐水。12.5天后,观察小鼠胚胎丢失情况;HE染色分析小鼠蜕膜组织形态;免疫荧光和RT-PCR检测小鼠蜕膜组织PRL、IGFPB1表达并进行分析。结果:细胞实验部分:1.LMWH能促进孕早期人蜕膜基质细胞增殖,与对照组相比,LMWH组基质细胞中Cyclin D1、PCNA表达增加。2.LMWH能促进孕早期人蜕膜基质细胞迁移和侵袭能力。与对照组相比,LMWH组基质细胞中MMP2、MMP7表达量增加。动物实验部分:1.RSA组小鼠胚胎丢失率显著高于对照组(P<0.01)。与RSA组相比,LMWH组小鼠胚胎丢失率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。LMWH组和对照组相比,无统计学差异(P>0.05)。2.RSA组小鼠蜕膜组织变性,与对照组相比,蜕膜细胞及血管数量明显减少,胞浆水肿明显,细胞核固缩。与RSA组相比,LMWH组蜕膜细胞及血管数量增多,胞浆水肿缓解。LMWH组和对照组相比,蜕膜组织无明显区别。3.RSA组PRL、IGFBP1表达量显著低于对照组(P<0.01)。与RSA组相比,LMWH组PRL、IGFBP1表达量显著升高(P<0.01)。LMWH组和对照组PRL、IGFBP1表达量无差异(P>0.05)。结论:LMWH能通过促进孕早期基质细胞的增殖及迁移能力,增强基质细胞蜕膜化程度从而改善妊娠结局。
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